sgRNA Screening and Genotype Confirmation Kit

CRISPR/Cas9是一种来源于细菌获得性免疫的由RNA指导Cas9蛋白对靶向基因进行编辑的技术。CRISPR/Cas9的切割是通过向导RNA(gRNA)与打靶基因组位置之间～20bp碱基的配对，且打靶序列的3′端需要有PAM结构(NGG)，再引导Cas9作用实现的。CRISPR/Cas9与靶位点识别的特异性主要依赖于gRNA与靠近PAM处10-12bp碱基的配对，而其余远离PAM处8～10bp碱基的错配对靶位点的识别影响不明显，这导致了CRISPR/Cas9存在一定的脱靶性，可能发生非特异性切割，引起基因组非靶向位点的突变，这样会造成研究结果的不确定性以及研究工作量的大量增加。

CRISPR/Cas9基因编辑系统能有效解决这一问题。sgRNA体外转录试剂盒（abs60162）能体外高效转录不同的sgRNA片段，进一步通过sgRNA体外筛选试剂盒（abs60161）筛选出高效率的sgRNA，用于后续科研实验。
产品组分：

实验方法：

提取基因组DNA，设计引物使用2×Amplification Mix PCR扩增得到含有编辑位点的目的片段后进行体外切割。

体外切割系（20μl）：

37°C反应1h，70°C加热10min终止反应。琼脂糖胶电泳检测。