传统的2D细胞培养体系虽然有很多优点,但这些模型缺乏维持原位细胞特性,无法反应细胞与细胞,细胞与基质之间的互相作用。通过纯化分离所得的原代细胞在体外2D培养之后也会失去其原有的功能和特性,3D细胞培养的出现很好的解决了这些问题。
一、3D细胞培养
◆LONZA全新细胞培养系统 3D细胞培养系统
----RAFTTM 将细胞包被于I型胶原蛋白中,RAFTTM Absorber可用于浓缩并构建精确控制的高密度胶原支架,为细胞提供更接近于体内的环境。
已知的建立的RAFTTM 3D细胞培养模型有胰岛模型、角膜模型、肿瘤共培养模型、呼吸系统模型、神经系统模型(血脑屏障)、肝脏模型。
----RAFTTM可以支持单一细胞类型培养或多种细胞类型的共培养。
单细胞3D培养模型(细胞处在胶原表面和胶原中)
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四种细胞共培养模型
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◆Lonza 提供不同种类的原代细胞(部分如下)
品牌 | 产品名称 | 货号 | 规格 | 描述 |
LONZA | 正常成人表皮角质形成细胞NHEK-Ad | CC-2501 | ≥500,000 cells/ampo | 配套培养基00192060 |
LONZA | 正常人新生儿表皮角化细胞NHEK-Neo | CC-2503 | ≥500,000 cells/ampo | 配套培养基CC-3111 |
LONZA | 人肺成纤维细胞NHLF | CC-2512 | ≥500,000 cells/ampo | 配套培养基CC-3132 |
LONZA | 人冠状动脉平滑肌细胞CASMC | CC-2583 | ≥500,000 cells/ampo | 配套培养基CC-3182 |
LONZA | 人冠状动脉内皮细胞HCAEC | CC-2585 | ≥500,000 cells/ampo | 配套培养基CC-3202 |
LONZA | 人主动脉内皮细胞HAEC | CC-2535 | ≥500,000 cells/ampo | 配套培养基CC-3162 |
LONZA | 正常人支气管/气管上皮细胞NHBE | CC-2540/2541 | ≥500,000 cells/ampo | 配套培养基CC-3170 |
LONZA | 正常人星形胶质细胞NHA | CC-2565 | ≥500,000 cells/ampo | 配套培养基CC-3186 |
LONZA | 人肝细胞 | CC-2591 | 3 – 6 × 106 viable | 配套培养基CC-3198 |
LONZA | 人脐带血 CD4+ T Cells (冻存) | 2C-200 | ≥20 million cells | 配套培养基CC-3211 |
◆基质胶细胞培养系统
BD Matrigel是从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中提取出基底膜基质,其主要成分有层粘连蛋白、Ⅳ型胶原、巢蛋白、硫酸肝素糖蛋白,还包含生长因子和基质金属蛋白酶等。BD Matrigel基底膜/基质胶形成的三维培养基质,可促进上皮细胞、肝细胞、Sertoli细胞、黑色素瘤细胞、血管内皮细胞、甲状腺细胞及毛囊细胞等的贴壁与分化。同时,Matrigel还能影响乳腺上皮细胞的蛋白表达,支持外周神经的新生和牛输卵管上皮细胞的分化。
示意图
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3D细胞培养相关产品
品牌 | 产品名称 | 货号 | 描述 |
LONZA | RAFT™ Absorbers for 24-well plate, 48 qty | 016-1R32 | 48个24孔板孔径样式的 吸收塞 |
LONZA | RAFT™ Insert Absorbers for 24-well plate, 48 qty, for inserts | 016-1R33 | 48个24孔板孔径样式的 插入吸收塞 |
LONZA | RAFT™ Plate Kit, 4 x 96 -well clear plate & 4 x 96-well absorber | 016-0R92 | 4×96孔板孔径样式的 吸收塞 |
LONZA | RAFT™ Reagent Kit | 016-0R94 | 1 x 瓶I型胶原≥ 100 mL 1 x 瓶 10X MEM ≥ 15 mL 1 x 瓶 中和溶液≥ 10 mL 4 x 混合瓶 |
LONZA | RAFT™ 96-well bundle kit (contains 016-0R94 & 016-0R92) | 016-1R10 | 包含货号016-0R94 和 货号016-0R92 |
LONZA | RAFT™ 24-well bundle kit, contains (016-0R94 & 016-1R32) | 016-1R24 | 包含 货号016-0R94 和 货号016-1R32 |
LONZA | RAFT™ 24-well Insert bundle kit (contains 016-0R94 & 016-1R33) | 016-1R25 | 包含货号016-0R94 和 货号016-1R33 |
LONZA | RAFTTM 24-Well Small Kit, 3D Reagents & 24-Well Absorbers - 12 Reactions | 016-1R16 | 12个反应和12个24孔板孔径样式的吸收塞 |
LONZA | RAFTTM 96-Well Small Kit, 3D Reagents and 1 x 96-Well Plate and Absorbers | 016-1R17 | 1×96孔板孔径样式的吸收塞 |
LONZA | RAFTTM 24-Well Small Transwell Kit, 3D Reagents and Transwell Absorbers - 12 Reactions | 016-1R18 | 12个反应,12个24孔板孔径样式的插入吸收塞 |
BD BioCoat | 基底膜基质(低生长因子) | 356230 | 5ML |
BD BioCoat | 人胚胎干细胞专用的基底膜基质 | 354277 | 5ML |
BD BioCoat | 基底膜基质不含酚红,无LDEV | 356237 | 10ML |
BD BioCoat | 基质胶(高浓度) | 354248 | 10ML |
3D类器官培养
类器官(organoids)-- 通过在体外培养胚胎或成体干细胞,让其增殖分化形成具有一定形态结构及功能的类似于器官的3D细胞团结构。这些细胞结构虽然不是真正意义上的人类器官,但能在结构和功能上模拟真实器官,因此,其在科学研究中发挥着越来越重要的作用。
现有的3D培养的球体形成实验:往往缺乏能自我增殖及分化的干细胞和祖细胞。
常用的各种动物模型:在某种程度上虽然能模拟人的生理状况,但是由于各种不确定变量的出现,通量的限制,人和动物生理的差别导致动物模型还是有所缺陷,因此需要构建一种能够弥补以上缺陷的生物模型,而3D类器官则完美符合了这种模型的需要。
类器官培养流程
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类器官3D培养基本过程:将永生化的细胞系、原代细胞系、干细胞或外植体等放在基质胶中,以模拟细胞体内生长环境的体外培养方法,然后添加各种生长因子和小分子化合物来诱导分化成不同的类器官。
小肠类器官的培养流程
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◆3D类器官培养基质胶
产品 | 产品名称 | 货号 | 规格 | 描述 |
R&D | Cultrex® PathClear Basement Membrance Extract | 559826 | 2×5ml | 通用型 |
R&D | Cultrex® Organoid Qualified,Reduced Growth Factor Basement Membrance Extract(Type2),PathClear® | 596716 | 2×5ml | 低生长因子。适合生长旺盛细胞和嵌入法。为肠道和肝脏类器官最佳基质 |
◆3D类器官培养优质蛋白和小分子产品
针对不同类器官的培养提供方案
▶peprotech和absin产品种类齐全 细胞因子和重组蛋白(PeproTech)、小分子和激素(absin)。
▶peprotech是Hans Clevers 类器官研究的先行者的提供者 首个可长期培养的类器官 (小鼠小肠类器官)中使用PeproTech的Noggin和EGF,后期制备的各种类器官也均使用PeproTech的细胞因子和蛋白。
▶ PeproTech提供世界上最好的R-Spondin 1 生物活性高,稳定。
不同类器官培养应用的生长因子和小分子
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类器官 | 生长因子 | 小分子 |
小肠/结肠类器官 | EGF、Noggin、R-Spondin 1、Wnt-3a | A 83-01、Gastrin、Nicotinamide、SB 202190、Y 27632 |
胃类器官 | FGF-10、 EGF、Noggin、R-Spondin 1、Wnt-3a | A 83-01、Gastrin、Nicotinamide、SB 202190、Y 27632 |
肝脏类器官 | BMP-4、EGF、FGF-basic、FGF-10、HGF、Noggin、Wnt-3a | A 83-01、DAPT、Forskolin、Gastrin、Nicotinamide、 Y 27632、Prostaglandin E2 |
肺类器官 | Activin A、FGF-basic、FGF-4、Noggin | CHIR 99021、SB 431542 |
前列腺类器官 | EGF、Activin A、FGF-basic、FGF-10、Noggin、R-Spondin 1、Wnt-10b | A 83-01、SB 202190、Y 27632、Prostaglandin E2、Nicotinamide、Testosterone |
胰腺类器官 | FGF-10、 EGF、Noggin、R-Spondin 1、Wnt-3a | A 83-01、Nicotinamide、Gastrin |
肾类器官 | BMP-2、BMP-4、BMP-7、FGF-basic、FGF-9 | CHIR 99021、Retinoic Acid |
乳腺类器官 | Heregulinβ-1、R-Spondin 1、R-Spondin 2、Noggin、EGF、 FGF-basic、FGF-10、Wnt-3a | Prolactin、Y 27632 |
脑类器官 | FGF-basic、Noggin、DKK-1、 EGF、BDNF、GDNF | MK-2206、GDC-0068、Dorsomorphin、Y 27632 |
视网膜类器官 | SHH、Wnt-3a | CHIR 99021、Y 27632 |
内耳类器官 | BMP-4、 FGF-basic | A 83-01、SB 431542 |
类器官培养相关产品
品牌 | 产品名称 | 货号 | 规格 |
PeproTech | Human EGF | AF-100-15 | 100ug/500ug |
PeproTech | Human Noggin | 120-10C | 5ug/20ug |
PeproTech | Human R-Spondin 1 | 120-38 | 5ug/20ug |
PeproTech | Murine Wnt-3a | 315-20 | 2ug/10ug |
PeproTech | Human FGF-10 | 100-26 | 5ug/25ug |
PeproTech | Human BMP-4 | 120-05ET | 2ug/10ug |
PeproTech | Human FGF-basic | 100-18B | 10ug/50ug |
PeproTech | Human HGF | 100-39 | 2ug/10ug |
PeproTech | Human/Murine/Rat Activin A | 120-14 | 2ug/10ug |
PeproTech | Human FGF-4 | 100-31 | 5ug/25ug |
PeproTech | Heregulinβ-1 | 100-03 | 10ug/50ug |
PeproTech | Human R-Spondin 2 | 120-43 | 5ug/20ug |
PeproTech | Human/Murine/Rat BMP-2 | 120-02 | 2ug/10ug |
PeproTech | Human BMP-7 | 120-03P | 2ug/10ug |
PeproTech | Human FGF-9 | 100-23 | 5ug/20ug |
PeproTech | DKK-1 | 120-30 | 2ug/10ug |
PeproTech | Human/Murine/Rat BDNF | 450-02 | 2ug/10ug |
PeproTech | Human GDNF | 450-10 | 2ug/10ug |
PeproTech | SHH | 100-45 | 5ug/25ug |
absin | A 83-01 | abs47028218 | 2mg/5mg/10mg/25mg |
absin | Gastrin | abs45150387 | 1mg |
absin | Nicotinamide | abs42023504 | 100g/500g |
absin | SB 202190 | abs810009 | 5mg/10mg/25mg/50mg/100mg |
absin | Y 27632 | abs812864 | 2mg/5mg/10mg/50mg |
absin | DAPT | abs810473 | 5mg/10mg/50mg |
absin | Forskolin | abs810050 | 5mg/10mg/25mg/50mg/100mg |
absin | Prostaglandin E2 | abs44129498 | 10mg/100mg |
absin | CHIR 99021 | abs810052 | 5mg/10mg/25mg |
absin | SB 431542 | abs810481 | 5mg/10mg/50mg/100mg |
absin | Prolactin | abs01322 | 10ug/50ug/1mg |
absin | Retinoic Acid | abs42026621 | 500mg/5g |
absin | MK-2206 | abs810621 | 5mg/10mg/50mg/100mg |
absin | GDC-0068 | abs810633 | 5mg/10mg/50mg/100mg |
absin | Dorsomorphin | abs810529 | 5mg/10mg/50mg/100mg |