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3D细胞培养、类器官培养

传统的2D细胞培养体系虽然有很多优点,但这些模型缺乏维持原位细胞特性,无法反应细胞与细胞,细胞与基质之间的互相作用。通过纯化分离所得的原代细胞在体外2D培养之后也会失去其原有的功能和特性,3D细胞培养的出现很好的解决了这些问题。

一、3D细胞培养


◆LONZA全新细胞培养系统 3D细胞培养系统

----RAFTTM 将细胞包被于I型胶原蛋白中,RAFTTM Absorber可用于浓缩并构建精确控制的高密度胶原支架,为细胞提供更接近于体内的环境。


已知的建立的RAFTTM 3D细胞培养模型有胰岛模型、角膜模型、肿瘤共培养模型、呼吸系统模型、神经系统模型(血脑屏障)、肝脏模型。

----RAFTTM可以支持单一细胞类型培养或多种细胞类型的共培养。

单细胞3D培养模型(细胞处在胶原表面和胶原中)

△点击放大图片

四种细胞共培养模型

△点击放大图片

 ◆Lonza 提供不同种类的原代细胞(部分如下)

品牌 产品名称 货号 规格 描述
LONZA 正常成人表皮角质形成细胞NHEK-Ad CC-2501 ≥500,000 cells/ampo 配套培养基00192060
LONZA 正常人新生儿表皮角化细胞NHEK-Neo CC-2503 ≥500,000 cells/ampo 配套培养基CC-3111
LONZA 人肺成纤维细胞NHLF CC-2512 ≥500,000 cells/ampo 配套培养基CC-3132
LONZA 人冠状动脉平滑肌细胞CASMC CC-2583 ≥500,000 cells/ampo 配套培养基CC-3182
LONZA 人冠状动脉内皮细胞HCAEC CC-2585 ≥500,000 cells/ampo 配套培养基CC-3202
LONZA 人主动脉内皮细胞HAEC CC-2535 ≥500,000 cells/ampo 配套培养基CC-3162
LONZA 正常人支气管/气管上皮细胞NHBE CC-2540/2541 ≥500,000 cells/ampo 配套培养基CC-3170
LONZA 正常人星形胶质细胞NHA CC-2565 ≥500,000 cells/ampo 配套培养基CC-3186
LONZA 人肝细胞 CC-2591 3 – 6 × 106 viable 配套培养基CC-3198
LONZA 人脐带血 CD4+ T Cells (冻存) 2C-200 ≥20 million cells 配套培养基CC-3211

◆基质胶细胞培养系统

BD Matrigel是从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中提取出基底膜基质,其主要成分有层粘连蛋白、Ⅳ型胶原、巢蛋白、硫酸肝素糖蛋白,还包含生长因子和基质金属蛋白酶等。BD Matrigel基底膜/基质胶形成的三维培养基质,可促进上皮细胞、肝细胞、Sertoli细胞、黑色素瘤细胞、血管内皮细胞、甲状腺细胞及毛囊细胞等的贴壁与分化。同时,Matrigel还能影响乳腺上皮细胞的蛋白表达,支持外周神经的新生和牛输卵管上皮细胞的分化。

示意图

△点击放大图片


3D细胞培养相关产品

品牌 产品名称 货号 描述
LONZA RAFT™ Absorbers for 24-well plate, 48 qty 016-1R32 48个24孔板孔径样式的
吸收塞
LONZA RAFT™ Insert Absorbers for 24-well plate, 48 qty, for inserts 016-1R33 48个24孔板孔径样式的
插入吸收塞
LONZA RAFT™ Plate Kit, 4 x 96 -well clear plate & 4 x 96-well absorber 016-0R92 4×96孔板孔径样式的
吸收塞
LONZA RAFT™ Reagent Kit 016-0R94 1 x  瓶I型胶原≥ 100 mL
1 x 瓶 10X MEM ≥ 15 mL
1 x 瓶 中和溶液≥ 10 mL
4 x 混合瓶
LONZA RAFT™ 96-well bundle kit (contains 016-0R94 & 016-0R92) 016-1R10 包含货号016-0R94 和
货号016-0R92
LONZA RAFT™ 24-well bundle kit, contains (016-0R94 & 016-1R32) 016-1R24 包含 货号016-0R94 和
货号016-1R32
LONZA RAFT™ 24-well Insert bundle kit (contains 016-0R94 & 016-1R33) 016-1R25 包含货号016-0R94 和
货号016-1R33
LONZA RAFTTM 24-Well Small Kit, 3D Reagents & 24-Well Absorbers - 12 Reactions 016-1R16 12个反应和12个24孔板孔径样式的吸收塞
LONZA RAFTTM 96-Well Small Kit, 3D Reagents and 1 x 96-Well Plate and Absorbers 016-1R17 1×96孔板孔径样式的吸收塞
LONZA RAFTTM 24-Well Small Transwell Kit, 3D Reagents and Transwell Absorbers - 12 Reactions 016-1R18 12个反应,12个24孔板孔径样式的插入吸收塞
BD BioCoat 基底膜基质(低生长因子) 356230 5ML
BD BioCoat 人胚胎干细胞专用的基底膜基质 354277 5ML
BD BioCoat 基底膜基质不含酚红,无LDEV 356237 10ML
BD BioCoat 基质胶(高浓度) 354248 10ML

3D类器官培养

类器官(organoids)-- 通过在体外培养胚胎或成体干细胞,让其增殖分化形成具有一定形态结构及功能的类似于器官的3D细胞团结构。这些细胞结构虽然不是真正意义上的人类器官,但能在结构和功能上模拟真实器官,因此,其在科学研究中发挥着越来越重要的作用。

现有的3D培养的球体形成实验:往往缺乏能自我增殖及分化的干细胞和祖细胞。

常用的各种动物模型:在某种程度上虽然能模拟人的生理状况,但是由于各种不确定变量的出现,通量的限制,人和动物生理的差别导致动物模型还是有所缺陷,因此需要构建一种能够弥补以上缺陷的生物模型,而3D类器官则完美符合了这种模型的需要。

类器官培养流程

△点击放大图片

类器官3D培养基本过程:将永生化的细胞系、原代细胞系、干细胞或外植体等放在基质胶中,以模拟细胞体内生长环境的体外培养方法,然后添加各种生长因子和小分子化合物来诱导分化成不同的类器官。

小肠类器官的培养流程

△点击放大图片


◆3D类器官培养基质胶

产品 产品名称 货号 规格 描述
R&D Cultrex® PathClear Basement Membrance Extract 559826 2×5ml 通用型
R&D Cultrex® Organoid Qualified,Reduced Growth Factor Basement Membrance Extract(Type2),PathClear® 596716 2×5ml 低生长因子。适合生长旺盛细胞和嵌入法。为肠道和肝脏类器官最佳基质


◆3D类器官培养优质蛋白和小分子产品

针对不同类器官的培养提供方案

▶peprotech和absin产品种类齐全   细胞因子和重组蛋白(PeproTech)、小分子和激素(absin)。

▶peprotech是Hans Clevers 类器官研究的先行者的提供者   首个可长期培养的类器官 (小鼠小肠类器官)中使用PeproTech的Noggin和EGF,后期制备的各种类器官也均使用PeproTech的细胞因子和蛋白。

▶ PeproTech提供世界上最好的R-Spondin 1 生物活性高,稳定。

不同类器官培养应用的生长因子和小分子

△点击放大图片

类器官 生长因子 小分子
小肠/结肠类器官 EGF、Noggin、R-Spondin 1、Wnt-3a A 83-01、Gastrin、Nicotinamide、SB 202190、Y 27632
胃类器官 FGF-10、 EGF、Noggin、R-Spondin 1、Wnt-3a A 83-01、Gastrin、Nicotinamide、SB 202190、Y 27632
肝脏类器官 BMP-4、EGF、FGF-basic、FGF-10、HGF、Noggin、Wnt-3a A 83-01、DAPT、Forskolin、Gastrin、Nicotinamide、
Y 27632、Prostaglandin E2
肺类器官 Activin A、FGF-basic、FGF-4、Noggin CHIR 99021、SB 431542
前列腺类器官 EGF、Activin A、FGF-basic、FGF-10、Noggin、R-Spondin 1、Wnt-10b A 83-01、SB 202190、Y 27632、Prostaglandin E2、Nicotinamide、Testosterone
胰腺类器官 FGF-10、 EGF、Noggin、R-Spondin 1、Wnt-3a A 83-01、Nicotinamide、Gastrin
肾类器官 BMP-2、BMP-4、BMP-7、FGF-basic、FGF-9 CHIR 99021、Retinoic Acid
乳腺类器官 Heregulinβ-1、R-Spondin 1、R-Spondin 2、Noggin、EGF、 FGF-basic、FGF-10、Wnt-3a Prolactin、Y 27632
脑类器官 FGF-basic、Noggin、DKK-1、 EGF、BDNF、GDNF MK-2206、GDC-0068、Dorsomorphin、Y 27632
视网膜类器官 SHH、Wnt-3a CHIR 99021、Y 27632
内耳类器官 BMP-4、 FGF-basic A 83-01、SB 431542


类器官培养相关产品

品牌 产品名称 货号 规格
PeproTech Human EGF AF-100-15 100ug/500ug
PeproTech Human Noggin 120-10C 5ug/20ug
PeproTech Human R-Spondin 1 120-38 5ug/20ug
PeproTech Murine Wnt-3a 315-20 2ug/10ug
PeproTech Human FGF-10 100-26 5ug/25ug
PeproTech Human BMP-4 120-05ET 2ug/10ug
PeproTech Human FGF-basic 100-18B 10ug/50ug
PeproTech Human HGF 100-39 2ug/10ug
PeproTech Human/Murine/Rat Activin A 120-14 2ug/10ug
PeproTech Human FGF-4 100-31 5ug/25ug
PeproTech Heregulinβ-1 100-03 10ug/50ug
PeproTech Human R-Spondin 2 120-43 5ug/20ug
PeproTech Human/Murine/Rat BMP-2 120-02 2ug/10ug
PeproTech Human BMP-7 120-03P 2ug/10ug
PeproTech Human FGF-9 100-23 5ug/20ug
PeproTech DKK-1 120-30 2ug/10ug
PeproTech Human/Murine/Rat BDNF 450-02 2ug/10ug
PeproTech Human GDNF 450-10 2ug/10ug
PeproTech SHH 100-45 5ug/25ug
absin A 83-01 abs47028218 2mg/5mg/10mg/25mg
absin Gastrin abs45150387 1mg
absin Nicotinamide abs42023504 100g/500g
absin SB 202190 abs810009 5mg/10mg/25mg/50mg/100mg
absin Y 27632 abs812864 2mg/5mg/10mg/50mg
absin DAPT abs810473 5mg/10mg/50mg
absin Forskolin abs810050 5mg/10mg/25mg/50mg/100mg
absin Prostaglandin E2 abs44129498 10mg/100mg
absin CHIR 99021 abs810052 5mg/10mg/25mg
absin SB 431542 abs810481 5mg/10mg/50mg/100mg
absin Prolactin abs01322 10ug/50ug/1mg
absin Retinoic Acid abs42026621 500mg/5g
absin MK-2206 abs810621 5mg/10mg/50mg/100mg
absin GDC-0068 abs810633 5mg/10mg/50mg/100mg
absin Dorsomorphin abs810529 5mg/10mg/50mg/100mg
  • 解决方案图片 解决方案 3D 类器官

    3D细胞培养,也就是让细胞在三维立体培养环境中生长,是近年来细胞培养的热门方法,随着3D培养出现,细胞培养模型更接近体内生理环境,和动物模型在药物试验效果上具有很高的一致性,可减少对动物实验的依赖,缩短研发周期,它势必成为细胞培养的趋势和潮流。 类器官(organoids)-- 通过在体外培养胚胎或成体干细胞,让其增殖分化形成具有一定形态结构及功能的类似于器官的3D细胞团结构。这些细胞结构虽然不是真正意义上的人类器官,但能在结构和功能上模拟真实器官,因此,其在科学研究中发挥着越来越重要的作用。