WB结果图的展示是非常重要的，无论是在做问题排查，组会汇报，还是发表文章的时候，它都是一个非常重要的窗口，可以展示出你想表达的意思，透露给别人足够的信息。
有的小伙伴实验做的非常完美，但是不会标注和展示，那么你的“观众”自然也领悟不到你表达的意思，就前功尽弃了。就像一道菜，端上来卖相不好，就会掩盖了背后的食材和做法。不会的小伙伴也别着急，小优细节君今天来教大家如何展示一张完美的WB结果图。
首先我们来看几张WB结果图，你能从中得到哪些信息？
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是不是看得直挠头，不知道想要表达什么意思，小优细节君也表示疑惑。在平时收到的咨询中很常见，如只发了一张图，问小优细节君是不是目的条带，哪个是目的条带。此时此刻，只能说出两个字：此时此刻，只能说出两个字：“标注”。
为什么要对结果图进行标注和展示呢？主要有以下几个原因：
01实验解读需要
WB结果不能只通过条带的有无来下结论，特异性也同样需要关注，简单来说就是需要全面的信息才能判断结果是否符合预期。
A：这次总算跑出来了，条带还可以：
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U：不错啊，PGC-1α不太好做，你这次做出来是多少kDa啊？
A：我看看原图啊。奇怪了呢，PGC-1α的理论分子量是91kDa，我这条带才在43kDa上左右，该不会真的加错抗体了吧？那可真是大乌龙！
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U：你看看标注的重要性，实验需谨慎啊~
02投稿发文需要
现在影响因子高的期刊都十分注重WB实验的原始数据，尤其是真实性。对发表的图片数据都有明确的要求，包括未经剪裁的全膜结果，Marker标注，样本信息标注等等。
小优细节君也明白大家做完实验后拖着疲惫的身体修改论文的感觉，那么我们尽量就在第一步就做到完美，尽量减少返工次数。
Nature
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提供未经剪裁的原始结果并做好标注以一一对应文中展示的结果图。
Cell
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提供未经剪裁的原始结果，如未能提供，可能延迟发表或拒稿。
PLOS ONE
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提供未经剪裁的原始结果，结果图中需包含相关对照；拼接重排不同膜的结果时需用垂直黑线清晰标示。
Frontiers
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尽量避免对结果图的裁剪，如果不可避免则提供未经剪裁的原始结果，如未能提供，可能拒稿；利用AI对结果图进行查重，若是重复需标注说明。
03及时整理标注，避免重复使用
为了保持良好的实验习惯，每次实验结束都应该及时保存并整理结果。可以想象一下，当检测的指标很多，如果没有任何标注，只看原始结果图，很难做到一一对应。如果不小心重复使用了，可能会前功尽弃。
04排查实验问题需要
当WB结果与预期不符时，为便于自己或他人协助分析结果。需要提供有效标注的结果图，既能针对性的找出疑问点，又能够减少双方反复确认信息所耗费的时间。
A：WB做不出来，请帮忙看下是什么问题，结果图：
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U：您好！遇到的问题是WB结果无信号对么？请提供抗体信息并在结果图中标注泳道信息和Marker分子量，以便分析处理。
A：是的，结果没有条带。用的是Caspase-3抗体，样本细胞是NIH/3T3。
U：结果看来不是检测全膜，您可以标注Marker分子量大小，我们需要确认一下裁膜区域是否包含Caspase-3的预测结果大小。
A：我是想检测剪切体的，裁膜分子量在33kDa以下。这个是标注好的图。
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U：您用的这支抗体既可以检测全长的 caspase-3 (35 kDa)，也可以检测剪切产生的 caspase-3 大片段 (17 kDa、19 kDa)。细胞经staurosporine处理（1uM，3 小时）理论上是可以产生剪切体的。您的裁膜区域不包含35kDa，建议全膜或扩大裁膜范围再检测一次，如果全长条带可以检测到，就需要进一步确认样本细胞的处理是否有效了。
A：好的，我再优化看看！
那么如何标注才能完美的展示WB结果呢？请接着往下看~
关键点1：全膜检测
虽然裁剪可以节省膜的使用，还能多个蛋白在同一块胶上同时检测，但是忽略了很重要的一点，很多时候蛋白会发生意想不到的修饰或者偏移，而裁膜往往依据不太准确的预染Marker，就会导致膜“压”不到条带，得到空白结果。有的时候，裁膜也会掩盖抗体特异性不佳的问题。
所以，我们尽可能要全膜检测蛋白，至少保留3~5个Marker，保证观察到蛋白的全貌。
关键点2：标注marker位置及大小
Marker是WB实验中必须要用到的分子量尺，所以在结果图中需要标注出来Marker的位置以及对应的分子量，以确认检测到的蛋白是否与预期大小一致。
关键点3：标注泳道信息
在对应泳道上方标注上样细胞或组织的具体名称以及造模处理方式，以直观对比各泳道样本的检测结果。
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关键点4：标注检测指标
在结果图旁标注出检测的蛋白名称，同时查看多个不同靶标结果时便于区分。
上图就满足了小优细节君列出的四个关键点，结果是不是就一目了然了呢。通过过表达以及KO，我们可以肯定100kDa附近的条带就是LPPR3。你学会了吗？
参考文献：
Kroon, Cristina et al. “Blind spots on western blots: Assessment of common problems in western blot figures and methods reporting with recommendations to improve them.” PLoS biology vol. 20,9 e3001783. 12 Sep. 2022, doi:10.1371/journal.pbio.3001783
Begum, Habeebunnisa et al. “Western blotting: a powerful staple in scientific and biomedical research.” BioTechniques vol. 73,1 (2022): 58-69. doi:10.2144/btn-2022-0003
