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肺癌在个体之间显示出明显的遗传和表型异质性，推动了对个性化医学的需求。肺癌症是全世界癌症死亡的主要原因。
肺癌在组织学上是多样的，包括三种主要类型(腺癌，鳞状细胞癌和小细胞癌)和几种不常见的类型(包括腺鳞状癌和大细胞神经内分泌癌)。
标准的分子靶向疗法有是根据遗传变异(例如EGFR)开发的突变和ALK融合，以及生物标志物的表达，例如已编程的死亡配体1(PD-L1)。
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实验步骤
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3D培养Matrigel
为了从肺肿瘤组织中建立肺肿瘤类器官，我们开发了3D培养Matrigel，使用MBM培养基，是抑制生长的培养基，Wnt3a和Noggin的耗尽导致正常细胞数量减少。
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MBM从原培养基中修改
MBM从原培养基中修改，包含表皮生长因子(EGF)，碱性成纤维细胞生长bFGF和N2，胰岛素和转铁蛋白的补充因子用于肺肿瘤起始细胞培养。
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嵌入Matrigel
为了在3D培养中建立LCO肺肿瘤类器官，需通过手术切除LC组织被分解为单个细胞或细胞簇，嵌入Matrigel，并淹没在MBM中。
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持续生成圆形
即使我们的MBM所含的试剂和生长因子少于其他培养基，其中包含几种试剂和生长包括FGF10，FGF4，FGF7，Noggin和Wnt3a，源于LC组织的LCO持续生成圆形。
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扩展球状类器官形态
LCO为培养六个月即可长期扩展球状类器官形态的变化，并通过标记物Ki67免疫标记测量来维持增殖能力。
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培养形成类器官
活检成功培养形成类器官。
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参考文献
P.S.以上实验步骤均来自文献总结，仅供参考
1.Patient-derived lung cancer organoids as in vitro cancer models for therapeutic screening. Nature Communications volume 10, Article number: 3991 (2019).
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7.Weeber, F., Ooft, S. N., Dijkstra, K. K. & Voest, E. E. Tumor organoids as a pre-clinical cancer model for drug discovery. Cell Chem. Biol. 24, 1092‒1100 (2017).