免疫捕获法:是一种基于抗体和配体特异性结合的分离和纯化技术。在外泌体纯化中,可选择外泌体表面的通用标志物进行结合,也可选择特殊细胞来源的外泌体标志物进行结合,纯化固定来源的外泌体。
图9. 免疫捕获法纯化外泌体原理示意图
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实验步骤
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- 2
- 3
- 4
- 5
添加
每孔加入100uL血浆,不够可用PBS与血浆1:1稀释。
震荡
封闭平板,室温震荡孵育20min。后4℃孵育过夜。
洗板
加入200μL/孔的洗涤缓冲液,直接倾倒,用300μL/孔的洗涤缓冲液洗涤3次。
捕获
捕获的外泌体可用于表面蛋白检测、或裂解获取RNA等。
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