膜亲和离心柱原理纯化外泌体是QIAGEN公司的专利技术，命名为exoEasy。ExoEasy实验方案不仅比超速离心更加快捷，而且可获得更洁净的纯化产物。扫描电子显微镜显示两种技术均可提供完整的预期尺寸的囊泡，不过通过超速离心法制得的样品中还含有一些并不符合EV尺寸或外形的更小的结构。
下方实验步骤：以exoEasy Maxi Kit，货号：76064为例
图10. exoEasy纯化外泌体流程示意图
△点击放大图片
实验步骤
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预过滤
推荐使用预过滤的血浆或细胞培养上清液。需要通过过滤去除大于0.8 μm的颗粒
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按照样本
缓冲XBP为1：1的比例混合，轻柔颠倒混匀5次。并使混合液达到室温。
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加入
将样本和缓冲XBP的混合液加入到柱子中，500g离心1 min。丢弃离心得到的液体，并将 柱子重新放入收集管。
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去除
加入10 mL缓冲液XWP，5000g离心5 min，去除柱子中剩余的液体。丢弃收集管及其中的液体。
注意：如转速要求不能达到5000g，可以将转速降低到3000g且不会对分离过程产生影响。 -
转移
将柱子转移到新的收集管中。
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离心
向柱子中的膜上加入400 μL – 1 ml缓冲液XE，孵育1 min。500 g离心5 min，收集洗脱液。
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重复洗脱步骤
重复洗脱步骤，孵育1 min。5000 g离心5 min。将洗脱液转移到合适的管中待用。
小tips电镜检测的时候要PBS稀释5倍以上 ;外泌体提出来后做电镜检测最好是及时做 ;如果放置1天左右的话，可4℃保存，长期可冷冻。 -
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