（1)概念
外泌体的拓扑结构是指其具有与细胞相同的拓扑结构，呈类细胞的形状。外泌体是由细胞分泌到胞外的纳米级囊状小泡，外包磷脂双分子层，内含核酸、蛋白质和磷脂，呈类细胞的拓扑结构，大小在30～150 nm之间。外泌体是细胞间通讯的重要介质，通过与目标细胞膜融合将包裹在内部的生物分子传递到目标细胞内，从而发挥其调控细胞生理进程的作用。在这一过程中，外泌体调节了细胞内生物分子的水平以及细胞间的拓扑结构，成为了生物拓扑学中的重要角色。因此，外泌体的拓扑结构也代表着其具有与细胞类似的形态和功能特征。
（2）鉴定方法
透射电子显微镜 （Transmission Electron Microscope, TEM） 是利用高能电子束充当照明光源而进行放大成像的大型显微分析设备，可以观察 nm 级细微结构，分辨率可达到 0.2 nm。通过透射电镜我们可以清楚直观的看到外泌体的典型结构。
鉴定方法
- 1
- 2
- 3
- 4
- 5
- 6
- 7
-
取出并混匀离心
将提供的外泌体样本从 -80 ℃ 冰箱从取出后置放于冰盒中，溶解后振荡混匀离心。
-
调整
根据样本情况，将样本调整至合适浓度或粘度。
-
吸取
使用移液枪吸取 15 uL 左右的外泌体样本于铜网上静置 1 min。用镊子夹铜网要轻，防止铜网夹破。
-
清洗
使用滤纸将铜网上的外泌体样本吸干，然后使用移液枪吸取 15 uL 左右的 2% 醋酸双氧铀染色液室温染色 1 min。若铜网可见较明显吸附物，可用纯水滴加表面，快速吸去，反复几次清洗。
-
风干
使用滤纸将铜网上的外泌体样本吸干，将染色完成的样本风干。
-
保存
观察拍照，保存图片。
-
注意事项
1. 夹取碳支持膜时不能破坏碳膜，影响制样及后续观察。
2. 样本浓度或粘度不宜过高，影响制样及后续观察。
3. 注意防护，染料可能对人体具有潜在的危害性。