以QIAGEN 77144/77164为例
推荐：用于液体样本中外泌体RNA纯化(包含miRNA在内的总RNA)，血清血浆样本的上样量为100uL-4 mL，100uL-8mLCSF,细胞培养上清的上样量为16 ml（测试最大至32mL）。如果使用的细胞培养上清样本，该柱子的承载量取决于细胞的类型和细胞的培养条件。使用细胞上清样本时，推荐使用无血清培养基或无外泌体血清体系，以免残留EV的干扰。
尿液中可能含有各种代谢物，它们可能会干扰RNA分析，例如，使用RT-PCR或RNA-Seq。为了确保分离的RNA的最佳性能，我们建议分别分离长RNA和短RNA物种（分别大于或小于约200nt）。对于短RNA的分离，使用试剂UI (77900)。为了分别分离长链和短链RNA，RNeasyMinElute清除试剂盒(74204)和额外的缓冲区RWT (1067933)。另一种选择是将分离短rna时使用的尿液量限制在2 ml，或者在分析前相应地稀释洗脱液。尽可能使用晨尿样本，通常比当天晚些时候收集的尿液集中得多。
实验步骤
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过滤
推荐使用预过滤的血浆或细胞培养上清液。需要通过过滤去除大于0.8 μm的颗粒，（如用 Sartorius® Minisart® NML (cat. no. 16592)过滤器）。
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按照样本
缓冲XBP为1：1的比例混合，轻柔颠倒混匀5次。并使混合液达到室温。
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加入
将样本和缓冲XBP的混合液加入到exoEasy spin column柱子中，500g离心1 min。丢弃离心得到的液体，并将柱子重新放入收集管。
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离心
加入3.5mL（或10 mL）缓冲液XWP，5000g离心5 min，去除柱子中剩余的液体。丢弃收集管及其中的液体。
注意：如转速要求不能达到5000g，可以将转速降低到3000g且不会对分离过程产生影响。 -
转移
将柱子转移到新的收集管中。
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旋转
在膜上加入700µL QIAzol。在5000 x g下旋转5 min以收集裂解液，并完全转移到一个2 ml的试管中（未提供）。
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涡旋
将含有裂解液的试管短暂地涡旋，并在室温下孵育5 min。这一步促进了核蛋白复合物的解离。注意：如果使用外参，在这个步骤添加到裂解液中。
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孵育
在含有裂解液的试管中加入90µL氯仿，并盖上盖子。用力摇晃15秒。后室温孵育2-3min。
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离心
4°C，12000xg离心15 min。（离心后，样品分为3个相：上部无色水相；薄的白色间期；以及较低的红色有机相。水相的体积应该约为400 μl。）
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转移并混合
将上部水相转移到新的收集管中（未提供），加入2体积的100%乙醇（例如，对于400µL的水相，加入800µL的乙醇），并通过上下移液几次彻底混合。请勿离心。立即继续执行到下个步骤。
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离心
将高达700µL的样品，包括可能已经形成的任何沉淀，注入2 mL收集管（提供）中的RNeasy MinElute旋转柱。轻轻关闭盖子，在室温下以≥8000xg（≥10,000rpm）离心15 s，弃废液。重复步骤一次。
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添加
将700µL Buffer RWT添加到RNeasyµl Elute旋转柱。轻轻关闭盖子，在≥8000xg（≥10,000rpm）下离心15 s。
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连接
将吸管500µL缓冲液RPE连接到RNeasy MinElute旋转柱上。轻轻关闭盖子，以≥8000xg（≥10,000rpm）离心15 s。
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离心
吸管500µL缓冲液RPE到RNeasy MinElute旋转柱上。关闭盖子，以≥8000xg（≥10,000rpm）离心2 min。
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离心
将RNeasy MinElute旋转柱置入一个新的2 ml收集管（提供）。打开旋转柱盖，全速离心5 min，干燥膜。丢弃带式的收集管。
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离心
将RNeasy MinElute旋转柱置于一个新的1.5 mL收集管（已提供）中。直接加入14µl无rna酶的水到旋转柱膜的中心。轻轻关闭盖子，让柱静置1 min，然后全速离心1 min，洗脱RNA。如果需要更高的RNA浓度，可以用10µL无RNA酶水洗脱，但产率将降低约20%。