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6.1.3 外泌体示踪-体内示踪

| 7.1 外泌体定量的原理,定量方法比较

SBI ExoGlow-Vivo EV labeling Kit 实现高灵敏度和高特异性活体标记,是研究外泌体生物分布和动力学实验的一大利器。

实验步骤

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  • 1

    制备染料储备液

    简单旋转试管,加入 25µL 无水二甲基亚砜。 
    涡旋 5 秒钟,使染料完全溶解
    离心管(短暂脉冲旋转至最大 RCF),收集管底重新悬浮的染料。

  • 2

    ExoGlow-Vivo 染色方案

    1. 在 500µL 1xPBS 中加入 2µL ExoGlow Vivo 染料至最多 250µg 蛋白等量的 EVs(通过 Qubit 或 BCA 检测法测定)。在 500µL 1xPBS 中加入 2µL ExoGlow Vivo 染料。 
    2. 室温下孵育反应 45 分钟至 1 小时。
    3. 使用您喜欢的方法从标记反应中纯化 EVs,或使用 ExoQuick

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    TC试剂(试剂盒中提供):基于 ExoQuick-TC 的 EV 回收

    1. 在反应中加入 167µL ExoQuick-TC(试剂盒中提供)。上下移动数次,充分混合。不要涡旋。
    2. 在 40C 温度下将反应培养 2 小时至 O/N。
    3. 以 13,000 x g 的转速旋转试管 10 分钟,以回收 EVs。
    4. 小心弃去上清液
    5. 将颗粒重悬于所选的无菌缓冲液(如 1xPBS)中至所需体积。 建议重悬体积 
    为 200-250µL。
    6. 标记的 EV 即可使用

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    热门产品

    ExoGlow™-Vivo EV Labeling Kit (Near IR)
    特点:
    针对动物模型中的外泌体成像进行了优化
    高灵敏度--近红外光谱可实现深层组织照明,消除自发荧光造成的背景影响
    高特异性-非亲油性染料克服了非特异性标记产生的背景
    快速标记方案可在 1 小时内完成从外泌体分离到注射用标记外泌体的整个过程
    体内外泌体跟踪、生物分布和动力学研究的理想选择
    评估工程性外泌体的靶向特异性
    器官归巢研究中示踪外泌体
    外泌体性能评价:比较不同的外泌体纯化方法如何影响生物分布以及其他体内参数
    适用于外泌体作为递送系统的ADME 研究
    兼容性强--适用于多种提取方法的外泌体
    易于使用--标记方案快速而直接
    功能强大-只需 250 µg 的外泌体即可使用


     

    图 10 ExoGlow-Vivo labeled EVs 展示非常稳定的型号在活体实验中
    △点击放大图片

     

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