下方实验步骤：以XStamp 系列为例
XStamp系列可以特意性递送外泌体。通过在外泌体表面放置组织特异性配体，您可以设计外泌体与特定的靶细胞相互作用。
图 17 实验流程示意图
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图 18 XStamp可提供的靶向细胞类型
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实验步骤
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转染供体细胞
供体细胞铺板，选择兼容的培养基，需要使用无外泌体胎牛血清，将细胞放回培养箱中，24小时后需达到70-80%的融合度
24小时后，将XStamp载体与所选择的转染试剂混合，按照适当的方案实现靶细胞的转染
24小时后换液
在转染后48-96小时内分离外泌体 -
XStamp外泌体的分离以及添加到靶细胞中
取出细胞培养基，放入15 mL或50 mL的离心管中。
在室温或4°C的3000xg下旋转离心管30分钟，以清除细胞碎片。将上清液转移到一个新的试管中
在1：5体积的细胞培养基中加入ExoQuick-TC
倒置混合，在4°C下孵育过夜
在室温下，在1500 x g或4°C下旋转离心管30分钟（温度不影响EVs产量）。弃上清液，在100 uL PBS中重悬含颗粒状EVs
在Nanodrop上使用A280测量EVs的产率。调整浓度至1 μg/μL
将EVs加入到含有目标细胞的细胞培养皿中。对于6孔板格式的靶细胞（>1.5x10^5细胞），250 ug的EVs就足够了。识别靶细胞效应所需的外泌体数量可能因细胞类型和所检测的特定表型而异；因此，可能需要优化特定的实验条件 -
热门产品
XStamp cloning and expression lentivector MSCV-Leader-MCS-C1C2-EF1-Puro
针对不同系统类型有不同的靶向产品
可构建稳定的供体细胞系
在外泌体表面展示对应的目标序列
图 19 质粒图谱
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图 20 XStamp 可以实现更好的靶向
△点击放大图片增加受体细胞外泌体吸收
EV-Entry System 是SBI 公司专用的用于增加受体细胞外泌体吸收的增强试剂。具有以下特点：
快速--只需不到一小时的时间就能完成整个程序
简单--只需将两种试剂添加到外泌体中，室温孵育，然后添加到受体细胞中即可
性能优越--大大提高外泌体和其他外囊泡向受体细胞输送蛋白质和 RNA 的能力
图 21 实验流程
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实验步骤：以EV-Entry Reagent System Kit 为例
货号EVEN105A-1
注：建议使用大约107的EVs（50-100 μg蛋白）添加到大约20万个受体细胞中。可以相应地增加or减小用量
1、EVs颗粒在93 μL无菌DMEM培养基中重悬浮（不含胎牛血清和抗生素）
2、在EVs悬浮液中加入5μL 20X EV-Entry Reagent A和2 μL 1X EV-Entry Reagent B，上下移液混合均匀
3、将外泌体与EV-Entry试剂在室温下孵育45分钟
4、将整个EVs悬液添加到目标细胞中，以增强cargo传递