8.3.4 外泌体工程化-外源性装载-电转仪

（1）Ingenio®电转解决方案
Ingenio® 解决方案是一种广谱电穿孔解决方案，适用于许多不同的细胞类型，毒性小，当与推荐的程序设置一起使用时，可提供与 Nucleofector® 试剂盒中提供的各种解决方案相似的结果。Ingenio®试剂盒（包括溶液，电击杯和细胞滴管）与多个仪器兼容，并有助于需要核酸递送到细胞的广泛应用。所有Ingenio®产品均可单独购买，提供了一种具有成本效益的替代方案。 

图1：Ingenio® EZporator®电转系统
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（2）Ingenio® EZporator®和电转方案优势：
性能：将任何核酸输送至难以转染的干细胞和原代细胞
简单：在所有细胞类型中使用单一通用电穿孔溶液
灵活性：轻松优化每种细胞类型的电穿孔参数
兼容：与大多数传统电穿孔设备兼容，包括Lonza Amaxa®， Bio-Rad® or Harvard BTX®
成本：节省资金，降低研究成本，同时最大化成果
便捷：每个电转系统都搭配免费的Ingenio电转试剂盒（8个反应）和操作手册
（3）Ingenio®电转方案进行高效电转
 

图2 利用Ingenio® EZporator® Electroporation System的高效电转。
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（4）兼容大部分常规电转设备

 

图3 Ingenio®电转试剂盒搭配 Amaxa® Nucleofector® II/2b 设备适合在多种细胞类型（原代细胞）上进行电转。
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图4  Ingenio®电转试剂盒搭配Bio-Rad®GenePulser Xcell™系统设备适合在多种细胞类型上进行电转。
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图5 Ingenio®试剂在Amaxa®Nucleofector®II/2b上展现了相当的效果。
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图6  Ingenio®在效率和可行性方面优于其他电穿孔解决方案(Bio-rad，Gene Pulser-Xcell）。
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（5）转染实验步骤

步骤一、收集感兴趣细胞并计数
步骤二、细胞离心、重悬在Ingenio®电转溶液中
步骤三、DNA加入进细胞配置混合溶液。吸取DNA/细胞混合溶液进电击杯。
步骤四、Ingenioo® Ezporator上设置程序，进行电转
步骤五、电转后的细胞转移至温育的培养基中
步骤六、孵育12-72h,后检测

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（1）原理

Nucleofector ™技术是—种基于通过施加电脉冲在细胞膜中瞬间产生小孔，综合各种Nucleofector ™程序和细胞类型特异性电转试剂，使核酸底物不仅可以输送到细胞质，还可以通过核膜进入细胞核。这使得细胞最高转染效率可达99%，并使转染成功不依赖于细胞的增殖分裂。

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（2）NucleofectorTM技术的组成
NucleofectorTM技术由NucleofectorTM仪器、细胞特异性的缓冲液和操作手册组成。 
NucleofectorTM仪器：内置针对各种细胞优化好的电脉冲程序，程序可在仪器触摸屏上直接选择。Lonza提供了不同功能摸块平台，可供大家选择（X模块，Y模块，96孔模块，LV模块及384孔模块）。 

试剂盒：试剂盒是包含有细胞特异性缓冲液，补充剂，专用电极耗材，pmaxGFPTM阳性质粒等。细胞特异性缓冲液和补充剂为细胞转染提供保护，既保证了高转染效率与细胞活率，又帮助细胞维持良好的生理功能性状。我们提供有一系列的优化转染试剂盒与操作手册。 

数据库与操作手册，在我们的数据库中为大家提供600种以上细胞的转染数据和操作手册。优化的操作手册除了操作指导外，还包括细胞来源、传代、生长条件、培养基以及转染后培养等细节技巧。

 

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