实验步骤
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产品描述
cDNA克隆是以大肠杆菌形式提供，冻存于含8%甘油的LB肉汤中
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运输和储存
干冰运输，到货后-80℃储存
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序列验证
建议LB平板划线挑取至少3个单克隆进行测序验证，以确保克隆的准确性
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贮存培养物制备
经划线分离、测序验证结果正确的克隆，建议在新的含有对应抗生素的LB肉汤中进行培养，培养完全后，吸取920μL大肠杆菌培养物至聚丙烯管中，添加80μL无菌甘油混合均匀后放置-80℃冻存
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FAQ
Q1: 在哪里可以找到cDNA克隆的完整载体图谱？
A1: 提供在线质粒图谱信息，您可通过点击网页中您的克隆的描述旁边的[+]找到详细信息。“Details”标签包括一个到质粒序列的超链接，以及5'和3'克隆限制位点的指示。“Sequence”标签包含克隆插入序列的链接
Q2: 为什么细菌甘油储存液是黄色的？
A2：我们的一些大肠杆菌培养物是用惰性生长指示剂——苯酚红培养的。该指示剂在pH值8.2及以上时呈红色，随着pH值的下降开始变为橙色，然后变为黄色。pH值为6.8时呈黄色。随着大肠杆菌的生长，它们会释放出二氧化碳，从而降低肉汤的pH值，并将指示剂的颜色从红色变为黄色
Q3: 如果cDNA克隆无法生长，有什么建议吗？
A3: 首先确保使用了正确的抗生素和浓度；尝试从解冻的母管中接种；轻轻上下倒置混合母管悬液，确保在接种前细胞没有沉淀在底部