实验步骤
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- 2
- 3
- 4
子板准备
准备新的96孔板,每孔加入~160μL 2x LB肉汤培养基(含8%甘油,100μg/mL ampicillin)
母板准备
将母板从冰箱中取出,在甘油菌还处于凝固状态时撕开封口膜,尽可能减少交叉污染,不揭开板盖的情况下等待母板内容物溶解,溶解后,用蘸有70%乙醇的纸巾擦拭盖子下面的凝结物
母板复制操作
a. 轻轻地将移液器枪头置于解冻的母板孔中,并在孔内轻轻移动以混合培养物,一定要确保刮到板孔的底部
b. 轻轻将枪头从母板中取出,并轻轻放入准备好的目标子板中,以同样的方式混匀
c. 弃掉移液器枪头
d. 分别盖上母板和子板的盖子
e. 重复以上步骤,直至文库中所有母板完成复制
f. 将母板放回-80℃冰箱
g. 将接种好的子板置于30℃培养箱培养24h
h. 置于-80℃长期冻存Dharmacon可提供的cDNA/ORF文库
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