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4.1 防撤稿,流式必做项

| 5.1 炎症因子检测

实验步骤

  • 1
  • 2
  • 3
  • 4
  • 1

    FCR阻断剂

    Fc受体是指细胞表面能够与免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM、IgE和IgD)结合的分子。其广泛存在于NK细胞、肥大细胞、巨噬细胞、中性粒细胞的表面。FcR能够与抗体的Fc段结合,在检测时产生假阳性。使用FcR阻断剂,可以消除假阳性降低检测背景获得更清晰的结果

     

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    货号 产品名称 包装规格
     BD PMG   564219 Human BD Fc Block 50ug
    BD PMG  550270  Rat BD Fc Block 0.1mg
      BD PMG    553141 Mouse BD Fc Block 0.1mg
  • 2

    细胞活力染料/死活细胞鉴定

    死细胞同样会与抗体产生非特异性结合,造成检测的背景。通常情况,会使用PI或者7-AAD来对死细胞进行染色,但是它们对核酸的结合不够稳定,洗涤会造成假阴性的结果;而且,这两种染料的光谱都非常宽,补偿难以调节,所以在多色检测、尤其是胞内染色时,需要用到可固定的细胞活力染料:Fixable Viability Stain (FVS)Reagents

     

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    货号 产品名称 包装规格
    BD PMG 562247 BD Horizon Fixable Viability Stain 450 0.1 mg
    BD PMG 564406 BD Horizon Fixable Viability Stain 510 0.1 mg
    BD PMG 564407 BD Horizon Fixable Viability Stain 520 0.15 mg
    BD PMG 564405 BD Horizon Fixable Viability Stain 660 0.1 mg

     

  • 3

    圈门指标:CD45

    CD45由一类结构相似分子量较大的跨膜蛋白组成,广泛存在于白细胞表面。CD45分子在所有白细胞上都有表达,是细胞膜上信号传导的关键分子,在淋巴细胞的发育成熟,功能调节及信号传递中具有重要意义。建议联合CD45和SSC设门,确定淋巴细胞群。淋巴细胞群通常呈现CD45强阳性和SSC弱表达;相对于淋巴细胞,单核细胞的CD45呈弱表达,SSC呈中等强度表达;嗜碱性粒细胞的CD45和SSC均为弱表达

     

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  • 4

    除粘连体

    由于各种原因,细胞与细胞会粘在一起,连续通过激光照射区,被仪器认定为一次信号。当两个细胞挤在一起通过仪器,与单个细胞相比,测量高度不变宽度和面积变为两倍,即出现FSC-Height不变,FSC-Area和Width增大的现象,分析数据时,如果没有排除粘连体,就可能对结果的判断造成误导。

     

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