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细胞或细胞群的活力是反映细胞健康的总体情况。活力测定旨在评估细胞的物理和代谢状态，以确定治疗或培养条件对细胞稳态的影响。
细胞健康与疾病之间的关键联系强调了可在不同实验背景和模型系统中测量细胞活性的必要性。
细胞活性测定
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测定法 |
测量内容 |
检测方法 |
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XTT 测定法/Resazurin 测定 |
测量活细胞中的线粒体活性 |
酶标仪 |
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7-AAD/CFSE 细胞介导的细胞毒性检测试剂盒碘化丙啶 Ghost Dye™ / 7-AAD |
细胞活力染料用于监测进入非活细胞的染料摄取； 染料不能进入活细胞 |
Fc流式细胞术 |
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磷酸化组蛋白 H3 （蛋白质印迹）增殖细胞核抗原 (PCNA) Ki-67 (IHC) |
测量细胞分裂所需（或参与）的蛋白质表达水平 |
WB、IHC、FC流式细胞术 |
实验步骤
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方法一：XTT测定法
XTT Cell Viability Assay Kit 是一种能检测细胞代谢活性的比色检测试剂盒。在检测期间，黄色四氮唑盐 XTT 在代谢活跃的细胞中被脱氢酶还原成高度着色的甲臜染料。这种转化仅会发生在活细胞中，因此，产生的甲臜量与样品中的活细胞成比例。在此方法中形成的甲䐶染料溶于水，可以用分光光度计在波长为 450 nm 处测其吸光值进行定量。PMS（N-甲基吩嗪硫酸甲酯）等电子偶联剂会显著提高细胞中 XTT 的还原效率。
C2C12 细胞按不同密度接种在 96 孔板上，并孵育过夜。平板中加入 XTT 检测溶液来孵育细胞。在 1.0、2.0、3.0、4.0 和 5.0 小时测量在 450 nm 处的吸光度。
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方法三：FVS系列死活染料
FVS为氨基反应性染料，与细胞表面或者内部的蛋白不可逆的结合。FVS是染细胞表面或膜内侧的游离胺，活细胞弱阳，死细胞强阳。正是由于和PI 、7-AAD原理不同，所以对于一些需要固定破膜步骤的试验FVS一样适用，如果固定破膜后细胞发生死亡，该染料还是能反应细胞的死活情况，这点是核酸染料所不能替代的。
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