实验案例
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实验案例
案例使用VPD450研究细胞增殖与IL-2的关系
CD4+富集的小鼠脾细胞先用1M VPD450共孵育10分钟，然后细胞用抗CD3/CD28 抗体刺激后在规定时间内收集。收获前4-6小时，细胞用PMA/离子霉素刺激，同时加入BD Golgistop™ 蛋白转运抑制剂。细胞经固定破膜后，用IL-2抗体染色后在BD™ LSR Ⅱ流式细胞仪上检测。
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检测细胞周期最常用的方式就是检测细胞DNA含量，正常生长的细胞都会经历分裂过程，G0/G1期是两倍体时期，S期DNA开始合成，到G2/M期，细胞处于四倍体时期，之后细胞一分为二，进入下一个细胞周期。
特性
染料
固定破膜
特点
激光
细胞膜不通透性
PI
是
最常用
蓝黄绿激光
DAPI
是
CV值最小
紫外激光
细胞膜通透性
Hoechst33342
是，但活细胞也可
活细胞标记
紫外激光