4.1 6色T细胞分型检测

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使用T细胞亚群多色方案对小鼠T细胞进行特性研究来自C57小鼠(N=3)的脾脏进行代表性分析。首先根据光散射特性去黏连得到单细胞，再利用FSC-A和SSC-A圈中目的细胞。通过CD45+SSC-A白细胞门，识别了CD3+T细胞。通过CD4+/CD8+确定 CD4+辅助T细胞和细胞毒性T细胞。最后，通过CD44/CD62L确定出Naive/Effector Memory/CentralMemorv/Effector四类T细胞亚群。在3激光12色BD Celesta流式细胞仪上采集样本。使用Flowjov10软件进行数据分析。脑图和热图等使用Flowjov10软件上的T-SNE、FlowSOM以及ClusterExplorer插件创建。

 

标志物	荧光染料	克隆
CD3	FITC	145-2C11
CD4	Percp-cy5.5	RM4-5
CD8	PE	53-6.7
CD44	PE-CY7	IM7
CD45	APC-CY7	30-F11
CD62L	AF700	MEL-14