T淋巴细胞,是由来源于骨髓的淋巴干细胞,在胸腺中分化、发育成熟后,通过淋巴和血液循环而分布到全身的免疫器官和组织中发挥免疫功能,按细胞表面分化抗原(CD)的不同,可分为CD4+T和CD8+T两大亚群,其中CD4 Th细胞在免疫调节中起促进作用,其功能为产生多种细胞因子,传递抗原信息,促进T、B细胞分化增殖,辅助B细胞产生抗体和诱导迟发性变态反应等 。目前Th细胞最常检测Th1、Th2、Th17 和Treg 四个亚群,其分泌的细胞因子及行驶的功能在疾病研究中都具有深远意义。本方案采用感染类疾病病人样本,展示在外周血病⼈样本中 TH1 TH17 Treg 的多色骨架panel。
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标志物 | 荧光染料 | 克隆 |
L/D | FVS510 | / |
CD25 | BV421 | M-A251 |
IFN-γ | BV605 | B27 |
IL-17A | BV650 | N49-653 |
CD45 | Percp-cy5.5 | HI30 |
FOXP3 | PE | 236A/E7 |
CD4 | BB515 | RPA-T4 |
CD3 | APC-CY7 | SK7 |
实验步骤
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流式结果图展⽰
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使用FlowJOV10.8.1对多色方案进行分析:
通过T-SNE插件进行大数据分析,图中不同颜色代表不同亚群情况,采用violinBox插件分析,“云峰”高度代表不同指标的表达强弱,通过图中也能明显对的发现样本经过刺激后 出现胞吞现象,CD4 荧光强度变弱,数据采集来自BeckmanCytoFLEX(3L13S)流式细胞仪。