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CAR-T，全称Chimeric Antigen Receptor T-CellImmunotherapy，即嵌合抗原受体T细胞免疫疗法，是⼀种治疗肿瘤的新型精准靶向疗法，有可能快速、高效地治愈癌症。简单来说，就是用患者的T细胞来消灭肿瘤细胞。CAR-T细胞通过重定向T细胞应答，使其针对特异性肿瘤抗原，克服了以往T细胞免疫治疗的局限性。同时，CAR能够以主要组织相容性复合物非依赖性方式识别抗原，使其能够靶向更多类型的抗原。
| 标志物 | 荧光染料 | 克隆 |
| CD4 | PE | L200 |
| CD25 | PE-CY7 | M-A251 |
| CD127 | APC-R700 | HIL-7R-M21 |
| CD38 | APC-CY7 | HIT2 |
| L/D | BV510 | / |
| CD45 | BV711 | HI30 |
| CD8 | BV605 | SK1 |
| CD45RO | BV421 | UCHL1 |
| TIM-3 | BV650 | 7D3 |
| PD-1 | BUV737 | J43 |
| CD45RA | APC | HI100 |
| CCR7 | BB700 | 3D12 |
| CD95 | PE | DX2 |
实验步骤
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数据分析说明
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首先根据光散射特性去黏连得到单细胞，再利用死活染料圈取所有活细胞。通过CD45+CD3+圈取所有的淋系细胞群。再通过圈取辅助T淋巴细胞(CD4+)和毒性T淋巴细胞(CD8+)用CD25+CD127-圈取调节性细胞。并对各个细胞亚群进行免疫检查点(PD-1+、TIM3+)以及活化程度(CD25+、CD38+)的分析。在5激光18色BD Fortessa流式细胞仪上采集样本。使用Flowjo v10软件进行数据分析。脑图和热图等使用Flowjo v10软件上的T-SNE、FlowSOM以及Violin插件创建。