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7.1 31色T细胞分型检测

| 8.1 单细胞多组学

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通过⼀个31色深度⾼维的Panel,使用细胞表面染色来检测分型Y细胞亚群和人外周血和淋巴结的免疫表型。除了适应性T细胞标记物外,还包括TCR Vα24-Jα18、TCR γδ、TCR Vɑ7.2和CD161来分别鉴定iNKT、γδ T和MAIT细胞,它们是先天样T细胞。同时纳入了C-X-C趋化因子受体(CXCR3、CXCR4、CXCR5、CXCR6)和C-C基序趋化因子受体(CCR4、CCR6、CCR7),以鉴定Th细胞亚群(Th1、Th2、Th17)、Tfh细胞亚群(Tfh1、Tfh2、Tfh17)和具有特定归巢能力的Th细胞。此外,还使用了标记物来评估细胞分化(CD45RO、CD7)、活化(CD57、CD95、HLA-DR)和⼀些共信号分子(PD-1、NKG2D、CD28)的表达。特别是,CD69和CD103被纳入用于进⼀步分析组织驻留记忆T(Trm)细胞。

 

标志物 荧光染料 克隆 意义
CD45    APC-R700 HI30 White blood cell lineage
CD3   BUV805  UCHT1 Tcelllineage
CD4   BV750 SK3  T-celllineage
CD8   BV786 RPA-T8  Tcelllineage
CD56    BV650 NCAM16.2 NK cell lineage/NKT-like cel
CD25  BV421  M-A251  Regulatory Tcell lineage
CD127   PE-Cy5  HI-7R-M21 Regulatory T-cell lineage
TCR y7.2   BV570  OF-5A12 MAIT cell lineage
TCR yó   APC B1  y8T cell lineage
TCR Va24-J18 BV711  6B11  iNKT cell marker
CXCR3    BV510 1C6 Tfh
CXCR3    BV510 CXCR3 Th marker
CXCR4  BUV563  12G5  Th marker
CXCR5   BUV615 RF8B2  Tfh marker
CXCR6  BB700  13B 1E5  Th marker
CCR4    BUV395 1G1 Th marker
CCR6   BUV496  11A9 Tfh
CCR6   BUV496  11A9 Th marker
CCR7    APC-Cy7 2-L1 ·A Naive cell marker
NKG2D  BB660  1D11  Costimulation molecule
CD69   BB790  FN50 Activation
CD69   BB790  FN50 tissue residency marker
CD103    BB630 20000000 Tissue residency marker
CD45RO PE-CF594   UCHL1  Memory cell marker
CD161   BUV737 DX12  MAIT cell marker
CD28  PE  CD28.2  Costimulation molecule
CD95  BUV661  DX2  Activation
CD95  BUV661  DX2  exhaustion marker
CD57   BV480  NK-1 Terminal differentiation
CD7   PE-Cy7  M-T701 Naïve
CD7   PE-Cy7  M-T701 effector T cel
PD-1   BB515  M-A251 Exhaustion marker
HLA-DR    BV605 G46-6 Activation marker

实验步骤

  • 1
  • 2
  • 1

    结果数据说明

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    tSNE analysis of T cells from PBMCs stained using our 31-parameter panel, with main subsets indicated

  • 2

    Cytometry A

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    2021 Mar;99(3):273-277. doi: 10.1002/cyto.a.24272. Epub 2020 Dec 10.OMIP 071: A 31-Parameter Flow Cytometry Panel for In-Depth Immunophenotyping of Human T-Cell Subsets Using Surface Markers

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