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11.1 ELISPOT

10.1 细胞因子运量检测方法:CBA

视频素材来源于JOVE  https://www.jove.com/cn/v/2221
版权归原作者所有

 

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ELISPOT在检测抗原特异性低频分泌效应分子的T细胞时,具有极高的检测灵敏度,可以得到稳定的、高度可重复性的数据,因此广泛应用于T细胞的免疫研究中。例如:通过分析T细胞对广泛抗原肽库的反应性,寻找免疫应答过程中的精细特异性与决定因素;通过测定T细胞针对不同浓度抗原的免疫反应,以评估不同状态下的免疫亲和力;通过对T细胞释放的多种效应分子进行检测,定义它们各自的效应谱系/功能。此外,T细胞在经历ELISPOT检测后依旧保持其生物活性,因此它们可以在回收后重新进行下游相关实验,获得额外的信息

实验步骤

  • 1
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    Workflow

    △点击放大图片

  • 2

    T细胞ELISPOT产品

    △点击放大图片

     

    案例——疫苗免疫原性检测(SARS-COV-2 特异性T细胞免疫应答)

     

    △点击放大图片

    背景:由于免疫力减弱以及机体抗感染能力的减弱,卫生机构建议接种第三剂COVID-19同源或异源疫苗,因此作者团队就口服雾化腺病毒5型载体COVID-19疫苗(Ad5-nCoV)的安全性及免疫原进行相关测定,其中免疫原性的测定使用了ELISPOT方法。

    样本类型:human PBMC

     

    检测指标:IFN-γ/IL-2/IL-13

     

    结果说明:7天后,在Ad2-nCoV组中分泌SARS-CoV-2特异性IFN-γ和IL-2的细胞数量显着增加:与CoronaVac组相比,低剂量组的免疫反应高6-10倍,高剂量组高4-5倍。雾化Ad5-nCoV组中的特异性IL-13分泌的细胞数量也显著增加,与CoronaVac组相比,第7天免疫反应高0.2-6.7倍

     

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    种属 试剂盒类型 检测指标 货号
    Human ELISPOT(单⾊) IFN-γ 551849
    未包被/整板/10plate
    ELISPOT(单色) IFN-γ hIFNgp-2M/2
    预包被/可拆板/2plate
    ELISPOT(单色) IL-2 hIL2p-2M/2
    预包被/可拆板/2plate
    ELISPOT(单色) IL-4 hIL4p-2M/2
    预包被/可拆板/2plate
    ELISPOT(单色) IL-6 hIL6p-2M/2
    预包被/可拆板/2plate
    ELISPOT(单色) IL-12 hIL12p-2M/2
    预包被/可拆板/2plate
    ELISPOT(单色) TNF-α hTNFap-2M/2
    预包被/可拆板/2plate
    ELISPOT(双色) IFN-γ/IL-2 hIFNgIL2-2M/2
    预包被/可拆板/2plate
    Mouse ELISPOT(单色) IFN-γ 551083
    未包被/整板/10plate
    ELISPOT(单色) IFN-γ mIFNgp-2M/2
    预包被/可拆板/2plate
    ELISPOT(单色) IL-2 mIL2p-2M/2
    预包被/可拆板/2plate
    ELISPOT(单色) IL-4 mIL4p-2M/2
    预包被/可拆板/2plate
    ELISPOT(单色) IL-6 mIL6p-2M/2
    预包被/可拆板/2plate
    ELISPOT(单色) TNF-α mTNFap-2M/2
    预包被/可拆板/2plate
    ELISPOT(双色) IFN-γ/IL-2 mIFNgIL2-1M/2
    预包被/可拆板/2plate
    Rat ELISPOT(单色) IFN-γ rIFNg-2M/2
    未包被/可拆板/2plate

     

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