2.3  细胞培养上清样本制备

收集细胞培养上清

离心(4℃，3000g，10min)，取上清

检测前如发现沉淀，则进行二次离心(4℃，10000g，15min)

如需进行稀释，建议稀释后浓度保持在试剂LLOQ-ULOQ*范围内(*指最低检测下限与最高检测上限，详情需参照试剂盒说明)

标记样本信息，分装保存

1.可根据生长状况调整细胞培养时间
2.建议培养细胞时准备复孔(避免边缘效应)
3.血清中含有某些细胞因子(TGF-β)，建议无血清或低血清条件培养基
4.若使用无血清培养基，需添加5-10%的血清或0.5-1%的BSA用于稳定目标蛋白、避免吸附

5.收集前建议做支原体检测，避免污染
6.通常细胞培养上清可不稀释，若需稀释则保持样本浓度在试剂检测范围内
7.如不马上使用，需将样品放置于-80℃冰箱保存
8.强烈建议分装，每管100-300μL，反复冻融将严重影响检测的重复性和数据的可比性