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实验步骤
- 1
- 2
- 3
- 4
- 5
- 6
收集样本
待细胞生长至合适密度进行收集,加胰酶消化、PBS清洗重悬
离心
离心(1000g,4℃,10min),去上清
裂解
加入适量裂解液(107 细胞对应200μL裂解液),放置于4℃冰箱(20min)后
离心
离心(13000rpm,4℃,10min),取上清,建议进行两次离心和取上清
测定溶度、保存
测定BCA 总蛋白浓度,-80℃保存
注意事项
细胞、组织裂解液不能含有SDS和NP40去垢剂成分,高浓度的SDS会影响蛋白检出效果