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实验步骤
- 1
- 2
- 3
- 4
- 5
收集样本
使用PBS适当清洗组织样品,分解组织、称量分组(冰上)
裂解
加入适量组织裂解液(20mg对应200-300μL裂解液),冷冻研磨仪处理组织至匀浆(4℃),取出放置于4℃冰箱(20min)
离心
离心10min(13000rpm,4℃),取上清(建议进行两次离心和取上清)
测定溶度、保存
测定BCA 总蛋白浓度,-80℃保存
注意事项
细胞、组织裂解液不能含有SDS和NP40去垢剂成分,高浓度的SDS会影响蛋白检出效果
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