实验步骤
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收集样本
漱口后取痰液于50mL无菌离心管中,4℃保存并于2小时内处理,称重并加4倍体积0.1%二硫苏糖醇混匀,加入2倍体积的 PBS 缓冲液继续振荡15-20min,150目的金属丝网过滤
离心
离心(室温,1500 rpm,10 min),取上清
孵育
37℃振荡孵育15min(每5min移液器吹打混匀)
分装、保存
取上清分装、冻存
注意事项
1.建议加入蛋白酶抑制剂、EDTA
2.冻存后,4℃条件下储存≤1周,-20℃条件下储存≤1月,-80℃条件下储存≤2月
3.避免反复冻融