3.4 胶回收目的片段

向Gel Recovery Column中加入200μl buffer CBS，12000rpm离心1min，倒掉收集管中的废液，将Gel Recovery Column重新放回到收集管中。再向Gel Recovery Column中加入200μl的ddH₂O，12000rpm离心1min，倒掉收集管中的废液。将Gel Recovery Column重新放回到收集管中；

注：请使用当天处理过的Gel Recovery Column。

从琼脂糖凝胶中切下含有目的片段的凝胶，估计重量或精确称量重量。每100mg 1%琼脂糖凝胶加入100μl Binding Solution，如更高的琼脂糖凝胶，Binding Solution呈比例增加；

于50-60℃水浴5-10min，期间每2-3min间断轻微颠倒混匀，直至胶块完全融化；

注：对于400bp及以下片段，在溶胶后加入整个溶液0.5体积的异丙醇，可显著提高回收率。

将上述混合液转移至套有2ml收集管的吸附柱中，室温放置2min，12000rpm离心1min，取出吸附柱，并倒掉收集管中废液；

将吸附柱重新放回收集管中，加入500μl WA Solution，于12000rpm离心1min，倒掉收集管中废液；

将吸附柱重新放回收集管中，加入500μl Wash Solution，于12000rpm离心1min，倒掉收集管中废液；

重复步骤6一次；

将吸附柱重新放回收集管中，12000rpm离心1min，打开吸附柱盖子，室温放置5-10min或50℃放置3-5min，以彻底去除Wash Solution；

将吸附柱放入干净的1.5ml收集管中(试剂盒自带)，对于膜中央悬空加入30-50μl Elution Buffer，盖好盖子，37℃放置2min，12000rpm离心1min，离心管中的液体即为包含目的基因的溶液。