PCR的起始样本为DNA或RNA等核酸,原始样本中的核酸容易被随处存在的核酸酶所降解,在高温、暴露环境中,核酸降解的概率加大。
RNA样品保存液是一种无毒的可直接使用的样品储存液,能使细胞内的RNA与RNA酶分离,防止样本中RNA表达谱发生变化。加入样本保存液的样本中RNA在室温可以保存7天,4℃可以保存4周,-20℃、-80℃标本可以长期保存。在RNA样品保存液中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
下方实验我们以abs9268为例:
实验步骤
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计算保存液用量
根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNA样品保存液用量
RNA样品保存液的用量应当是组织体积的10倍(100mg组织约用1ml RNA样品保存液)
离心收集2×107细胞RNA样品保存液的用量是1ml;分装
将RNA样品保存液按需要量分装入自备保存管中;
切片
快速将较大的组织切成厚度<0.5cm的任意片状,较小的组织直接取下,立即完全浸入RNA样品保存液中;
保存
保存时先将样本浸入RNA样品保存液后置4℃冰箱过夜,然后转移到-20℃冰箱或继续转移至-80℃冰箱。