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简介和注意事项
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简介及注意事项
MSP能够在亚硫酸氢钠处理后确定靶DNA的甲基化状态。该方法需要设计两组引物：一组与不变的胞嘧啶(即基因组DNA中的甲基化)退火，另一组与亚硫酸氢盐处理基因组DNA中未甲基化的胞嘧啶产生的尿嘧啶退火。来自未改变序列的引物组的扩增产物表明胞嘧啶被甲基化，因此受到保护而不发生改变。
必须使用严格和高度特异性的PCR条件来避免非特异性引物结合和PCR伪影的扩增。这一点尤其重要，因为非甲基化胞嘧啶转化为尿嘧啶降低了DNA的复杂性，并增加了非特异性引物－模板结合的可能性。