4.4 基于Biacore的蛋白-蛋白互作—FAQ

由机型通道和实验目的决定；Biacore T100/T200/S200/3000：4通道，最多偶联3种不同样品；Biacore X100/X100 Plus：2通道，最多偶联1种样品；Biacore 8K 16通道，最多偶联8种不同样品；

纯度大于80%
使用新鲜的，具有活性的样品；偶联后，需保持蛋白活性
如果是商业化蛋白粉末，用水稀释到1mg/ml，分装在-20℃保存
确保溶解液不含有Tris等含有伯胺基的成分（可以用脱盐或者透析去除Tris），尤其注意商品化配体蛋白的缓冲液
尽量准备100ug左右备用

样品成分均一，不能有多聚物，异构体
样品中不能含有高折光率物质：如甘油，蔗糖，咪唑等
分析物的纯度要求：
动力学/亲和力测定：纯度>90%
特异性/浓度测定：细胞裂解液、血清等混合样品
分析物需要新鲜，有活性
使用运行缓冲液稀释
母液浓度为1mM，样品体积在200μL以上