逻辑设门方案
△点击放大图片
生物学背景
T细胞可塑性对于在不同微环境中的免疫应答的适应很重要,并且可以特异性地帮助宿主对不同组织定植的病原体进行防御。Naive T分为CD4+ αβ T细胞和CD8+ αβ T细胞,主要是在淋巴结之间巡逻、监视,一旦被抗原递呈细胞活化,前者可快速分化为效应或调节T,后者可分化为细胞毒T和记忆T。而Memory T分为中央记忆T和效应记忆T两个子类,前者主要位于次级淋巴器官,可针对再次出现的抗原快速增殖并分化为效应T,后者主要位于外周组织,一旦再次受到抗原刺激,可快速产生效应细胞因子。两者略有不同。
实验步骤
- 1
- 2
逻辑设门图&数据结果说明
△点击放大图片
使用T细胞亚群多色方案对小鼠T细胞进行特性研究
来自C57小鼠(N=3)的脾脏进行代表性分析。首先根据光散射特性去黏连得到单细胞,再利用FSC-A和SSC-A圈中目的细胞。通过CD45+SSC-A白细胞门,识别了CD3+T细胞。通过CD4+/CD8+确定CD4+辅助T细胞和细胞毒性T细胞。最后,通过CD44/CD62L确定出Naive/Effector Memory/Central Memory/Effector四类T细胞亚群。在3激光12色BD Celesta流式细胞仪上采集样本。使用Flowjo v10软件进行数据分析。脑图和热图等使用Flowjo v10软件上的T-SNE、FlowSOM以及ClusterExplorer插件创建。