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4.1 Mouse TBNK 骨架Panel

| 5.1 Mouse Treg Panel

逻辑设门方案

 

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生物学背景

所有的T细胞都来源于造血干细胞(HSC),造血干细胞之后会分化为多能祖细胞(MPP),多能祖细胞又会分化为共同淋巴祖细胞(CLP),CLP接下来只有三种分化路径,即T细胞B细胞NK细胞

B细胞,也称B淋巴球,是白血球中一种淋巴细胞的亚型。B细胞属于后天免疫系统的体液免疫,作用为分泌抗体。此外,B细胞能呈现抗原(也属于抗原呈递细胞)并分泌细胞激素。哺乳动物的B细胞在骨髓中成熟,骨髓位于多数骨骼的核心。

自然杀伤细胞是一种细胞质中具有大颗粒的细胞,简称NK细胞。由骨髓淋巴样干细胞发育而成,其分化、发育依赖于骨髓或胸腺微环境,主要分布于外周血和脾脏,在淋巴结和其他组织中也有少量存在。因为其非专一性的细胞毒杀作用而被命名

实验步骤

  • 1
  • 2
  • 1

    配色方案

    激光 标志物 荧光染料 克隆 体积/测试 货号
    Blue 488 nm CD3 FITC 145-2C11 2uL 553061
    NK1.1 PE PK136 5uL 557391
    CD4 Percp-cy5.5 RM4-5  5uL 550954
    CD45R PE-cy7 RA3-6B2 5uL 552772
    Red 640 nm CD45 AF700 30-F11 5uL 560510
    CD8 APC-cy7 53-6.7 5uL 557654
  • 2

    逻辑设门图&数据结果说明

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    使用TBNK细胞亚群多色方案对小鼠TBNK细胞进行特性研究

    健康小鼠(N=2)的脾脏代表性分析。根据光散射特性去黏连得到单细胞,再利用FSC-ASSC-A圈中目的细胞。通过CD45+SSC-A白细胞门,分别根据CD3+CD19+细胞检测出总TB细胞。进而通过CD4+/CD8+确定CD4辅助T细胞CD8细胞毒性T细胞。同时,根据CD3-NK1.1+CD3+NK1.1+确定出NK细胞NKT细胞两个亚群。在3激光12色BD Celesta流式细胞仪上采集样本。使用Flowjo v10软件进行数据分析。该图使用Flowjo v10软件上的T-SNE插件创建。

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