实验步骤
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标准品复融
使用蒸馏水复融标准品。重组的体积参考在包装瓶标签上。重组后的标准溶液可在-60°C或以下冷冻保存。
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标准品稀释
以下步骤参考以Human IL6检测为例：
用稀释液或细胞培养液将重组后的标准原液稀释3倍。取60µL原液，加入120µL稀释液或细胞培养基中。轻轻搅拌。获得标准曲线Std7：7500pg/mL。
使用上述Std7进行连续稀释制备标准曲线，如图19所示。
从Std6到Std0，每瓶中加入120µL稀释液或细胞培养基。
将100µL标准液加入130µL稀释液或细胞培养基中，轻轻混合，重复连续稀释，制成标准液：Std6、Std5、sStd4、Std3、Std2、Std1。
Std0(阴性对照)是稀释剂或培养基。
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STANDARD SERIAL DILUTIONS WORKING SOLUTIONS Standard Stock solution Reconstitute the vial following the indications given on the vial label 22.5 ng/mL Standard 7 60 μL reconstituted standard stock solution +120 μL diluent 7500 pg/mL Standard 6 100 μL Standard 7 +130 μL diluent 3260.9 pg/mL Standard 5 100 μL Standard 6 +130 μL diluent 1417.8 pg/mL Standard 4 100 μL Standard 5 +130 μL diluent 616.4 pg/mL Standard 3 100 μL Standard 4 +130 μL diluent 268 pg/mL Standard 2 100 μL Standard 3 +130 μL diluent 116.5 pg/mL Standard 1 100 μL Standard 2 +130 μL diluent 50.7 pg/mL Standard 0 130 μL diluent 0 图19：IL6标准品稀释标准及操作流程