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2.1 基础试剂

| 2.2 实验操作流程

THUNDER TM TR-FRET 技术可以灵活建立蛋白互作模型,实现快速、高通量的化合物筛选。

实验步骤

  • 1
  • 2
  • 3
  • 1

    抗体

    试剂包括抗标签抗体、链霉亲和素和抗免疫球蛋白抗体用作实验开发。Eu作为供体,FR作为受体。常用的标签包括GST、6His、FLAG、V5以及生物素等。

  • 2

    缓冲液

    ①抗体稀释缓冲液,即检测缓冲液,推荐使用商业化适合的专用检测缓冲液。 
    ②蛋白即样本稀释缓冲液:推荐使用蛋白储存缓冲液或50mM HEPES pH7.4,100mM NaCl,0.1%Triton X-100 和 0.1%BSA。

  • 3

    仪器和耗材

    使用配置有TR-FRET模块的酶标仪,在615 nm665 nm处选择性和有效地定量荧光。多数微孔板均可适用于该技术,推荐使用适配20μL检测体系的微孔板进行检测,兼容96孔,384孔和1536孔。

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