蛋白-蛋白相互作用（protein-protein interaction）在生物过程中起着核心作用，当这些相互作用发生异常时，可能会导致疾病的发生，例如癌症和神经退行性疾病。因此，开发能够靶向 并调节这些相互作用的阻断剂，对于治疗相关疾病具有重要意义。使用TR-FRET技术可以灵活建立蛋白互作模型，并实现快速、高通量的化合物筛选。
实验步骤
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加样
以384孔板为例，取微孔板平置于操作台，以5μL/孔加入蛋白X（4X）后，加入蛋白Y（4X），盖上封板膜（防止样本蒸发），室温静置，孵育60分钟。
Tips 1：孵育时间可依据蛋白特性进行优化调整，延长或缩短时间，多数蛋白样本60分钟时间足够。
Tips 2：蛋白相互作用实验通常实验在室温下进行。如果有特定温度要求，则可以在更高或更低的温度下孵育。此外，在某些情况下，如果没有看到信号或低信号，提高或降低孵育温度将增强信号，而不会增加背景。 -
加检测试剂
每孔加入5μL抗标签供体和5μL抗标签受体。（或可将检测试剂预混在一起，后以10μL/孔加入样本中）。盖上封板膜，室温静置，孵育60分钟。
Tips 1：在第一次实验时，可选择在1h、2h、3h、4h和18h进行多次检测，以获得最佳测检测信号。 -
读板
去掉封板膜，平行放入酶标仪，选择TR-FRET程序进行读值。