3.2 细胞处理（一板法）

1.在白色384孔浅孔板加入8μL细胞（按预先优化的密度）。
2.若研究药物为激动剂：
a.加入4μL激动剂(3X)。激动剂可使用无血清培养基稀释。
b.在室温(RT)或37°C下孵育一定时间（实验优化时间），需要确定最佳孵育温度。
3.若研究药物为抑制剂：
a.加入2μL抑制剂(6X)。抑制剂可使用无血清培养基稀释。
b.在RT或37°C下孵育一定时间（实验优化时间）。需要确定最佳孵育温度。
c.加入2μL激动剂(6X)。激动剂可使用无血清培养基稀释。
d.在RT或37°C下孵育一定时间（实验优化时间）。需要确定最佳孵育温度。

图9. 两板法细胞处理
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1.加入3μL的裂解缓冲液（5X）。
2.在摇床下孵育30分钟（轨道式平板摇床设置为400 rpm）。裂解孵育时间15-60 分钟之间进行调整。
注意:裂解物可直接用于目标蛋白检测或在-80°C 冷冻。