5.4 数据整理分析

荧光共振能量转移比(665 nm/615 nm)测量值可转换为cAMP浓度响应曲线，确定被测化合物的EC50值。利用标准曲线可得到比值与cAMP浓度的换算。注意，这种转换将产生刺激的S状曲线，正如预期的激动剂一样。 

图20. 激动剂浓度与cAMP含量响应曲线
△点击放大图片

该示例为表达内源性gs偶联腺苷A2a受体的U266B1细胞(2000个细胞/孔)中激动剂浓度-反应曲线的例子。A组为激动剂反应与cAMP标准曲线一起绘制为TR-FRET比值(665/615×1000)。注意，激动剂产生的信号在标准曲线的工作范围内。B组为激动剂反应绘制为cAMP水平，以确定EC50值。C组为同样的激动剂，用百分比表示刺激效率。
注意：
在细胞滴定实验的分析开发过程中，应确定最佳细胞密度，使测量信号落在cAMP标准曲线的IC10-IC90范围内。

更多领域应用，请联系优宁维获得详细介绍。