实验步骤
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加样
取15µL细胞裂解液从96孔培养板移至96/384孔浅孔板。
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加阳性对照
加入15µL阳性裂解物（原液）作为阳性对照（PC：Positive Control）和15µl 裂解缓冲液（1X）作为阴性对照（NC：Nagtive Control）。
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加检测试剂
每孔中加入5μL 的检测抗体混合液 Eu-Ab1+FR-Ab2（4X）。
注意：如果使用的是Phospho + Total protein Detection Kit，请在含有15 μL裂解液的孔中加入5μL 4X Eu-Ab1 + FR-Ab2用于检测Phospho -protein或5μL 4X Eu-Ab3 + FR-Ab4用于检测Total protein。 -
孵育
盖上封板膜，室温（RT）孵育 1-18 小时，具体取决于检测试剂盒（参考 TDS）。
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读板
移除封板膜。在TR-FRET兼容的微孔板阅读器上酶标仪读板。
Tips：同一板可以读取多次而不会对分析性能产生负面影响。