3.3 细胞裂解

用移液器小心地除去细胞培养基。

立即加入50 μL 1X补充裂解缓冲液。裂解液体积(25-50µL)可优化。

在RT下振荡孵育30分钟(轨道板式振动筛设置为400 rpm;温和搅拌)。裂解孵育时间(15-60分钟)可以优化。
Tips：
1.裂解物可在-80°C冷冻或立即用于目标蛋白检测。
2.细胞裂解步骤通常在室温下进行30min。增加孵育时间可能导致高裂解液粘度，使液体更难以移液，从而可能降低结果的准确性。但是如果需要更高的灵敏度，可以减少裂解缓冲液的体积，减少裂解缓冲液或许可以提高实验窗口(适用于两板法贴壁细胞方案)。