视频素材来源于Abnova https://www.youtube.com/watch?v=GhJTn74xxC0
版权归Abnova所有
细胞复苏，是指将冻存在液氮或者-80℃冰箱中的细胞解冻之后重新培养，细胞恢复生长的过程。
细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融，这样可以最大限度的保存细胞活力。复苏细胞应采用快速融化的方法，这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化，避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。
实验步骤
- 1
- 2
- 3
-
37℃水浴锅速溶
从液氮罐中取出冻存管，置于-80℃冰箱数分钟，迅速放入37℃水浴锅中持续摇动，使其在2min内迅速融化。注意不要把冻存管的管口没入水浴中防止污染；
-
加入培养瓶中培养
完全融化后，冻存管用75％酒精擦拭冷冻管外杀菌后，打开盖子，吸出冻存管的细胞悬液，缓慢加入到含有培养液的培养瓶中，37℃、5%CO2培养。
-
如果需要去除冷冻保护剂
如果细胞需要去除冷冻保护剂，用移液枪将细胞悬液注入15mL无菌离心管中，再加5mL完全培养基。根据细胞类型选择合适的离心速度，低速离心5min，弃去上清，加入2-3mL预热的完全培养基，轻轻吹匀，保证细胞完全重悬；
用培养液适当稀释后，将重悬的细胞接种到培养皿或者培养瓶中，37℃、5%CO培养，24h后，更换新鲜培养基，去除死细胞；当细胞长到80-90%汇合度后进行传代。
△点击放大图片