2.1 细胞培养与传代介绍

原代培养是指细胞直接从组织中分离出来，放在细胞培养瓶或培养皿中培养的过程。而当细胞不断生长繁殖，细胞间相互紧贴，形成接触抑制;

营养物质不足以及代谢物累积，导致细胞生长速度缓慢，状态变差甚至死亡，因此需要传代培养来避免这种情况的发生。传代培养即将细胞消化稀释，分装到两个或两个以上的培养瓶或培养皿中使之继续生长的过程。一般认为原代细胞是指从原代培养的第1代传至第10代的细胞；

细胞系为原代细胞首次传代成功的细胞;

细胞株则是传代培养过程中培养的第10代至第50代细胞，其遗传物质较原代细胞发生改变，具有无限增殖的能力。

贴壁培养是指贴壁依赖型细胞贴附在一定固相表面进行生长繁殖的过程。悬浮培养是指某些不具有贴壁生长特性的细胞，只能在可流动的液体培养基里生长繁殖的过程。

细胞培养有四个主要的目的。第一，扩增或筛选目的细胞，维持细胞活性;

第二，验证细胞功能变化，包括增殖、周期、凋亡、分泌等功能；第三，刺激增殖、分化;

第四，可以用于药物筛选、药效验证以及细胞治疗。

在细胞培养过程中，常用的设备耗材是冰箱、培养箱、移液器、生物安全柜以及细胞培养皿、细胞培养瓶；

常用到的试剂包括培养基、血清、抗生素、培养基添加物、细胞因子、小分子化合物。根据细胞种类的不同，选择的培养基也不一样，例如：细胞系可以选择使用HyClone品牌的经典培养基及血清，而原代细胞则需要用到Lonza品牌的原代培养基，免疫细胞则可选择Lonza品牌的X-vivo培养基。另外，在细胞培养和分化的过程中，根据生长条件的不同也会用到一些生长因子，例如R&D品牌的Wnt-3a、Noggin、R-Spondin 1和EGF等。除此之外，还会用到许多的辅助试剂，比如胰酶、双抗、PBS、DPBS等。