实验步骤
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预先配制冻存液
冻存液比例多种，根据细胞的特性进行调整冻存液的比例：5%—10%DMSO + 20%—90%血清 + H0%—70%基础培养液；放在室温备用或放在4℃预冷；
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离心收集细胞
离心收集对数生长期的细胞(贴壁细胞消化下来离心，悬浮细胞直接离心，转速1200rpm或250g，时间3min)；
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分装到冻存管中
用配制好的冻存液重悬细胞，按照1~1.5mL/管分装到冻存管中，拧紧管盖，做好标记；
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梯度降温
采用手动梯度降温，冻存管按照4℃(20min)→-20℃(30min)→-80℃(24h)→液氮的顺序放置。
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