原代细胞分离是指将组织从生物体内取出并分散制成细胞悬液后从中获取目的细胞的过程，获得高纯度、高活性的原代细胞是很多细胞实验成功的关键要素之一。原代细胞分离的方法有很多种，根据样本材料的不同，可分为悬浮细胞的分离方法、实体组织的分离方法和细胞分选。
分离方法简介
- 1
- 2
- 3
-
悬浮细胞分离
悬浮细胞的分离方法，适用于组织样本材料来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，首先进行低速离心，然后收集细胞沉淀，用PBS(不含钙、镁)洗两次，再用培养基洗一次;
最后，用培养基重悬细胞，调整细胞浓度后分瓶培养。若想要提取的细胞不在沉淀中，而是在细胞悬液中，则需要加入细胞分离液，经离心后，由于各种细胞的密度不同可在分离液中形成不同层，从而分离出细胞。
-
实体组织分离
实体组织的分离方法，适用于实体组织材料样本，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)、消化分离法、组织处理器结合组织解离试剂盒这三种方法。机械分散法(物理裂解)分离细胞虽然简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差；
消化分离法则无法保证高效率、高活性地提取单细胞；组织处理器结合组织解离试剂盒则能在结合二者的优势的基础上避免各自存在的缺陷，温和、高效地提取单细胞。
-
细胞分选
细胞分选，适用于多细胞样本，是根据细胞所具有的特性将某种特定的细胞亚群从混合的细胞样品中分离出来的一种技术。常用的细胞分选的方法有两种：流式细胞分选和免疫磁性细胞分选。流式分选一般是电荷式分选，即对感兴趣的目标细胞(荧光染色或标记)所在的液滴充以正负不同的电荷，在高压电场的作用下发生偏转，从而实现分选。磁珠分选使用磁珠偶联的抗体去标记细胞，然后把标记好的细胞悬液置于磁场中，带磁珠的细胞会被吸附，没有连接磁珠的细胞被洗脱，从而实现分选。