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2.2.2 贴壁细胞传代

| 2.2.3 悬浮细胞传代

视频素材来源于Abnova  https://www.youtube.com/watch?v=7d_kDu-P964
版权归Abnova所有

 

细胞传代是指在细胞培养过程中,去除原培养基并将细胞从原培养体系转移到新鲜的培养基中,维持细胞的活力与增殖的。细胞传代既可以扩大细胞培养量,也能够避免细胞因进入平台期而出现生长抑制甚至死亡的情况。

实验步骤

  • 1
  • 2
  • 3
  • 4
  • 5
  • 1

    PBS洗涤细胞

    从培养箱取出细胞培养瓶(一般选择处于对数期的细胞),转移到超净台。弃去原有培养液,用1-2mL PBS缓冲液洗涤1次(注意从侧壁加入,以免冲掉细胞),弃去PBS缓冲液;

  • 2

    胰酶消化

    向培养瓶中加入1mL胰酶,消化,将加入胰酶的细胞培养瓶转移到倒置显微镜下观察细胞消化情况,当细胞变圆且大量脱落时,转移到超净台;

  • 3

    终止消化,离心

    加入2mL完全培养基,终止消化。用移液器充分缓慢吹打,使细胞能够完全脱落。然后将细胞悬液转移至15mL离心管中,1000rpm/min离心5分钟,转移进超净台,打开盖子,弃去上清;

  • 4

    重悬细胞,加入新的培养瓶中

    用1mL完全培养基重悬细胞团块,制备细胞悬液,然后将细胞悬液分装进2个(或多个)含有4mL完全培养基的细胞培养瓶中,盖上瓶盖混匀;

  • 5

    放入培养箱中继续培养

    将细胞培养瓶放入37℃、5% CO2培养箱中继续培养。

     

    △点击放大图片

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