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3.5.2 慢病毒转染悬浮细胞

| 3.6 电转染(质粒DNA)

视频素材来源于YouTube  https://www.youtube.com/watch?v=NKuJ8ARm7AI
版权归原作者所有

 

某些病毒具有携带外源基因并且有效转运这些基因的能力,因此被用来作为基因运输载体。

病毒转染系统的分类:目前常用的病毒载体包括慢病毒载体、腺病毒载体和逆转录病毒载体等。

 

不同转染系统的比较

△点击放大图片

实验步骤

  • 1
  • 2
  • 1

    细胞培养

    2×105/mL悬浮细胞中加入polybrene至6 μg/mL和适量病毒充分混匀,37℃孵育;或者150g室温离心4小时(选做,部分难转染的细胞系采用此步骤可以提高转染效率);

  • 2

    继续培养及检测

    (对polybrene毒性敏感的细胞选作此步骤)4小时后(或离心结束后)加入等体积新鲜培养基以稀释polybrene;

    继续培养3-4天,中间视细胞生长情况可传代或换液并对转染效率进行检测。

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