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HE染色,又称苏木素-伊红染色法,其中苏木素是Hematoxylin,简称H,伊红是Eosin,简称E。HE染色对组织细胞的各种成分均可着色,便于全面观察组织构造,而且适用于各种固定液固定的材料,染色后不易褪色可长期保存。经过HE染色,细胞核被苏木素染成蓝紫色,细胞质被伊红染色呈粉红色。
实验步骤
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- 5
- 6
- 7
- 8
石蜡溶解
将切片置于70℃原位杂交仪中,烤片30min;
脱蜡
将烤过后的切片迅速放入二甲苯中,2次,各5min;
梯度水化
100%、90%、80%、70% 的乙醇中各放置5min,蒸馏水放5min;
核染
把水吸干,滴加苏木素染色液,染色5min,流水冲洗掉苏木素染液,显微镜观察染色程度;
分化
1%盐酸酒精分化1~3s,水洗,置于自来水中浸泡返蓝5~10min;显微镜观察颜色,若颜色不够深可直接滴加苏木素染色液染色1min后,再次分化立即水洗;若过深则适当增加分化时间;
复染
滴加0.5%伊红染液1滴,染色10~15s,蒸馏水清洗后显微镜观察;
梯度脱水
80%、90%、95%和100%乙醇进行脱水;二甲苯2次,各5min,室温晾干;
封片
滴加一滴中性树胶于组织上,盖玻片封片。24h后置于显微镜下观察拍照;