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4.2.2 Giemsa染色法

| 4.2.3 Hoechst 染色(贴壁细胞)

视频素材来源于abnova  https://www.youtube.com/watch?v=9xBcm-1NMqk
版权归原作者所有

 

Giemsa 染色是最常用的方法之一,它简便、快速,适用于多种细胞和染色体染色。吉姆萨染液由天青,伊红组成。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结果,染粉红色;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色。

实验步骤

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    染液制备

    Giemse粉0.5g、甘油22mL,在研钵内先用少量甘油与Giemsa充分混合,研磨至无颗粒;再将剩余甘油混在一起;56℃保温2小时后,加入33mL纯甲醇,保存于棕色瓶内。

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    染色步骤(以盖片培养法或涂片法为例)

    pH6.8~7.38的Sorensen缓冲液,按1:9比例Giemsa染液和Sorensen缓冲液混合配成染色液;细胞标本用甲醇固定10分钟,或1:3醋酸/甲醇固定30分钟,用滴管把染色液布满玻片上(注意不要有气泡,用染色缸染色亦可);染10~15分钟后,用自来水冲去玻片上多余的染料,空气干燥、二甲苯透明、光学树脂胶封固。

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    结果检测

    显微镜观察,胞核染成蓝紫色胞浆染成粉红色

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