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Feulgen染色法是一种鉴别细胞中DNA的组织化学方法。细胞中的DNA在60℃用1M HCl解离脱氧核糖核酸,使嘌呤碱基与糖苷键破坏,嘌呤碱脱掉,脱氧核糖的中的醛基游离;醛基能与Schiff试剂相结合,形成一种紫色的复合物。
实验步骤
- 1
- 2
- 3
- 4
细胞固定
单层盖片法培养细胞,Carnoy或醋酸/甲醇固定20分钟;
解离和染色
投入1M HCl 1~2分钟(室温);投入1M HCl 8~10分钟(60℃);投入Schiff剂中染色1~5小时(10℃暗处);
漂洗
漂洗液洗2次,每次2分钟;蒸馏水漂洗2次,每次3分钟;
脱水及封片
75%→100%酒精进行脱水;二甲苯2次,每次3分钟;把盖片置于载玻片上细(胞面向上),滴树胶少许,再加较大盖片覆盖;
盖片上加微型重物加压,置数日,树胶干后观察。镜下观察可见,细胞核染成粉红色至紫红色,胞质无色(为观察DNA,胞质可不必复染)。