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衰老细胞有高活性的β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)，通过原位染色，以X-Gal为底物，在β-半乳糖苷酶的催化下会生成深蓝色产物，通过光学显微镜即可观察。组织切片染色或细胞染色，用于检测观察细胞衰老情况。
实验步骤
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细胞培养及固定
对于6孔板中培养的细胞，吸除细胞培养液，用PBS或HBSS洗涤1次，加入1mL染色固定液，室温固定15分钟；
吸除固定液，用PBS或HBSS洗涤细胞3次，每次3分钟；
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染色
吸除PBS或HBSS，每孔加入1毫升SA-β-gal染色液；37℃孵育过夜，可以用保鲜膜封住防止染色液蒸发；
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显微镜观察
普通光学显微镜下观察。如不能及时观察计数，可以去除染色工作液，加入2mL PBS，4℃可以保存数天；或者加上封片液封片后，4℃可以保存较长时间。