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台盼蓝(Trypan Blue)是一种细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性与细胞的存活率,是细胞培养中最常用的细胞鉴定染色方法之一。正常的活细胞细胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,细胞不会被染成蓝色;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞可被台盼蓝染成蓝色。台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。
实验步骤
- 1
- 2
- 3
加入台盼蓝染液
等量混合台盼蓝和细胞悬液,轻柔摇匀混合;
显微镜观察
将10μL的混合液加入一标准血细胞计数器的凹槽里。用明场显微镜的40X〜60X的物镜进行检查;
细胞计数
计数至少200个细胞,记录正常和凋亡或死亡细胞的数量。早期凋亡时细胞由于台盼蓝的排斥呈现白色,但它们将会有不规则的形状或缩拢的核;