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MTT为黄色或橙黄色粉末状化学试剂，中文名噻唑蓝，主要用于细胞增殖及活性测定。MTT的检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO )能溶解细胞中的甲瓒，用酶标仪在490nm波长处测定其光吸收值。
实验步骤
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收集细胞，铺板
收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，每孔加入100μL，铺板使待测细胞调密度至1000-10000/孔(边缘孔用无菌PBS填充)；
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加药
5%CO2，37℃孵育，至细胞单层铺满孔底(96孔平底板)，加入浓度梯度的药物，细胞贴壁后即可加药。一般5-7个梯度，每孔100μL，设3-5个复孔；同时设置调零孔(培养基、MTT、二甲基亚砜)和对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜)；
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孵育
37℃孵育16-48小时，倒置显微镜下观察；
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加入MTT
每孔加入20μL MTT溶液(5mg/mL，即0.5%MTT)，继续培养4h。若药物与MTT能够反应，可先离心后弃去培养液，小心用PBS冲2-3遍后，再加入含MTT的培养液；
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终止培养
终止培养，小心吸去孔内培养液；
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加入二甲基亚砜
每孔加入150μL二甲基亚砜，置摇床上低速振荡10min，使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪OD490nm处测量各孔的吸光值；